线栓法建立兔局灶性脑缺血再灌注模型研究.doc

　　线栓法建立兔局灶性脑缺血再灌注模型研究 ：刘学军 孔令琦 隋庆兰 金丽英 刘广义 郭云良 唐建德 【关键词】 线栓 ［摘要］ 目的 探讨影响线栓法制作兔大脑中动脉闭塞（MCAO）再灌注模型成功率的因素及其解决方法。方法 成年健康新西兰兔103只，随机分为A组53和B组50只，每组再按体质量大小分3个亚组，A组应用同一标准头径的线栓，B组对应体质量不同而分别使用不同头径的线栓，比较A、B两组制作缺血再灌注模型的成功率。不成功的动物模型开颅取脑观察，并分析失败原因及其影响因素。结果 A组成功率（49.1%）明显低于B组（74.0％），差异有显著性（χ2=11.59，Plt;0.01）；46只不成功缺血再灌注模型中，插线过深者26只，占56.5%；插线深度不足者20只，占43.5%。结论 针对动物不同的体质量而选择相应大小头径的线栓，可获得较高的缺血再灌注模型制作成功率；插线过深及深度不足为缺血再灌注模型制作失败的主要原因。 ［关键词］ 脑缺血；再灌注损伤；兔；动物模型 ［ABSTRACT］Objective To investigate aking focal cerebral ischemia and reperfusion by intraluminal thread technique in rabbits. MethodsNely divided into te diameter of thread tip eter of thread tip aking the models odels ong 46 unsuccessful models, 26 proved in making ischemia models. Over or insufficient insertion of the thread are mon reasons for the failure in models. ［KEY RS）等新技术的迅速发展，可从影像学上对急性缺血性脑卒中的血流动力学、缺血区分子扩散及代谢情况进行较详细的描述。建立操作简便、稳定、可靠、重复性好的局灶性脑缺血再灌注动物模型，是进行这些研究的实验基础。目前，线栓法制作大脑中动脉闭塞再灌注（MCAOR）模型方法已被广泛而成功地应用于大鼠，而在制作兔MCAO模型的应用中仍相对较少［1~6］，仍然存在一些问题。本研究旨在探讨影响线栓法制作兔MCAOR模型成功率的因素及解决方法。现将结果报告如下。 1 材料与方法 1.1 动物及分组 选择新西兰兔103只，雌雄不限，体质量1.8~3.3 kg，健康状况良好，由山东省农业科学院实验动物中心提供。随机分为A组53只，B组50只。A组按体质量大小分为A1组13只，1.8~2.3 kg；A2组31只，2.4~2.8 kg；A3组9只，2.9~3.3 kg。A组动物均使用标准头径（0.51～0.55 mm）的线栓。B组亦按其体质量大小分为B1组12只，1.8~2.3 kg；B2组29只，2.4~2.8 kg；B3组9只，2.9~3.3 kg。B3~B3组按体质量大小分别对应使用不同头径的线栓，B1组0.46~0.50 mm，B2组0.51~0.55 mm，B3组0.56~0.60 mm。 1.2 线栓制作 将3号尼龙线（直径0.285 mm）剪成10 cm长的线段，在距线段的一端0.5~1.0 cm处，均匀涂上硅橡胶，直到线栓头端直径及形态达到所需要求，并在距离线栓头端6.0 cm处做标记。线栓头端直径用千分尺测量并控制在0.45~0.60 mm范围内，根据文献将0.51~0.55 mm作为标准线栓头径［7］。制备线栓应在实验前2~3 d进行，以保证线栓在使用前能充分晾干固定。 1.3 模型制作 动物称质量后，自耳缘静脉缓慢注射20 g/L的乌拉坦（5 mL/kg体质量）麻醉，常规消毒，无菌操作，颈部正中切口，充分暴露左侧颈总动脉（CCA）及颈动脉分叉，并向头侧小心分离出近段颈外动脉（ECA）和颈内动脉（ICA）。在ECA发出第一分支前结扎ECA，动脉夹暂时夹闭CCA和ICA，于ECA结扎处的近端将其剪断，用镊子钳住其残端并将其反折使之与ICA方向一致。将线栓经ECA残端向ICA内缓缓送入，遇到ICA上的动脉夹时则松开动脉夹继续插线。当线栓进入ICA超过4.0 cm且有轻微阻力感不能进线时应停止插线，记录线栓插入深度，并将ECA残端及线栓一同结扎固定，记录时间作为动脉阻塞开始时间［7］。再灌注时，用镊子或血管钳夹住线栓外露残端轻轻向外拉出，直至遇到明显阻力感不能继续时停止牵拉，记录时间作为再灌注开始时间。 1.4 MR检查 采用GE Signa 1.5 T的MR扫描仪，标准头线圈，动物仰卧位置于头线圈中央，在定位