植物染色体C-带显带技术研究.pdfVIP

遗传 IUREDITAS(Beijing)7(5远旦6-3生1些 实 与 验 方 植物染色体C一带显带技术的研究 技 法 术 王正询 林兆平 潘坤清 广（州师范学院生物系） 植物染色体分带在植物的核型分析、亲缘 染色液染色、镜检。将好的分裂相拍照，并记下 关系及远缘杂种鉴定等方面都有重要的应用价 座标，用乙醚脱池，用固定液 （甲寨:冰醋酸二 值。我国的常规染色体制片，有较好的基础，但 3:1)脱色，晾干后，再放人千燥器中约12小时， 在植物染色体C-带显带方面，．还存在着成功率 取出在58-60℃下烤片2小时，即可转人分带 低、分辨力不高及方法不统一等间题，故对现有 处理。 C-带处理流程加以改进，使之成为一种便于普 将制片分为若千组，按下法分别处理： 遍应用的常规实验技术成为十分必要。 (1)变动碱处理温度和时间，而将盐、酸的 本文在原有的BSG法基础上，对酸、碱、 处理固定在较弱的程度上。 盐等处理的时间、温度、浓度及顺序等方面进 a)25℃下，饱和氢氧化钡分别处理。秒、 行了探索，初步总结出了一套在去壁低渗制片 30秒,1,2,4,8,16,32,64分钟，然后以2XSSC 迭基础上的相对21定的L上己.劳-琉目02-丁7=，BSHta fit19C不处理 0-分锹再似冲召兵琪典c茎书势℃下处 (Bariumhydroxide/Saline/Hydrochlorieacid/Gie- 理30分钟。 msa）新流程。即对不同植物染色体的处理，采用 的碱处理温度为朽℃，余同上。 只变动盐溶液处理时间，而将其它因素全部固 (2）变动盐处理浓度，而将另二因素固定。 定起来的方法。这一新流程在很大程度上统一 a)45℃下饱和氢氧化钡溶液处理30秒、 了方法，提高了显带的成功率、分辨力与可靠 尔后在60℃下用2XSSC中分别处理0,10,20, 性，我们已在玉米、慧茵、玉米X惹该 河（南南阳 30,50,70分钟，再用0.2NHCl溶液25℃处理 地区农科所提供）、川谷、蚕豆、洋葱、蒜、油茶、 30分钟。 湿地松等多种植物上应用并获得成功。 b）用4XSSC60℃处理，余同上。 (3）变动酸处理时间，而固定另外二个因 材 料 与 方 法 素。 供试材料有玉米 Z（e。maysL.)-.慧该(Coix a)碱处理同 2（)a，然后用2XSSC溶液于 lacryma-jobiL.var.frumentaceaMakino),)I｝谷 60℃下处理20-35分钟 玉（米、川谷3，分，蚕 (Coixlacryma-jobiL.)、蚕豆 V（iciafabaL.), 豆20分），再以0.2NHCl25℃下分别处理0, 洋葱A（lliumceapL.),蒜 (AlliumsativumL.), 30,60,90分钟、2,3,6小时。 油茶 C（amelliaoleifera),湿地松 P（inuselliotiii b)改用O.1NHCl溶液处理，余同上。 Engelm）和待鉴定的玉米X慧该 (ZeamaysX