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DNA粗提取和鉴定1
琶莆醒肇魄蒲绸堵柳哀粮秋磁币现疏逮磋虑渺禽嗓锹遵楔隋润兰武救闷玄DNA的粗提取与鉴定1DNA的粗提取与鉴定1;讨论3:如何证明他们是遗传物质? ;(一)DNA的提取原理; ①根据DNA在NaCl溶液中的溶解度曲线图,思考在什么浓度下, DNA的溶解度最小? DNA在NaCl溶液中的溶解度是如何变化的?;②如何通过控制NaCl溶液的浓度使DNA在盐溶液中溶解或析出?;DNA; 洗涤剂是离子去污剂,能够瓦解细胞膜,有利于DNA的释放。
洗涤剂瓦解细胞膜的过程是乳化作用。乳化作用是将一种液体分散到第二种不相溶的液体中去的过程,最大一类的乳化剂是肥皂、去污粉和其他化合物,其基本构造系末端是极性基团的烷烃链,可以将脂质乳化为形成较小的脂质微粒。 ;①在_______的条件下,DNA与______ 反应呈蓝色。;(一)实验材料的选取;(二)破碎细胞,获取含DNA的滤液;植物细胞(如洋葱)需要先加入一定的________和______进行充分地搅拌和研磨,过滤后收集研磨液。;(三)去除滤液中的杂质;方案一:利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度的不同,通过控制NaCl溶液的浓度去除杂质。具体做法是:在滤液中加入NaCl,使NaCl溶液浓度为2mol/L,过滤除去不溶的杂质,再调节NaCl浓度为0.14 mol/L,析出DNA,过滤去除溶液中的杂质,再用2mol/L的NaCl溶液溶解DNA。;方案二:直接在滤液中加入嫩肉粉,反应10~15min,嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质。;(四)DNA的析出与鉴定;说明:预冷的乙醇溶液具有以下优点:
1、抑制核酸水解酶活性,防止DNA降解。
2、降低分子运动,易于形成沉淀析出。
3、低温有利于增加DNA分子柔韧性,减少断裂。;2、 DNA的鉴定;鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图;滤液+2mol/L的NaCl溶液40mL,玻棒沿一个方向轻缓搅拌,溶解核内的DNA,滤液中含DNA;5、过滤→取纱布上的滤物;7、加冷酒精使DNA析出(纯化); 对照 条件 现象;1、观察提取的DNA颜色,如果不是白色丝状物,说明DNA中的杂质较多;;(三)不同实验方法的比较;1、以血液为实验材料时,每100ml血液中需要加入3g柠檬酸钠,防止血液凝固。
2、加入洗涤剂后,动作要轻缓、柔和,否则容易产生大量的泡沫,不利于后续步骤的操作。加入酒精和玻璃棒搅拌时,动作要轻缓,以免加剧DNA分子的断裂,导致DNA分子不能形成絮状沉淀。
3、二苯胺试剂要现配现用,否则会影响鉴定的效果。;腹以浦戎郊溶惰侗粟城贤轿哺牧勉刚坝剿吠耙蠕嵌景嫡剔缴贷靛月镁补齿DNA的粗提取与鉴定1DNA的粗提取与鉴定1;1. 下列关于DNA粗提取与鉴定的说法正确的是
A.氯化钠的浓度越低,对DNA的溶解度越大
B.人血也可代替鸡血进行实验
C.柠檬酸钠的主要作用是加速血细胞破裂
D.DNA不能溶于酒精;2. 在破碎鸡血细胞时,要先加入20ml的蒸馏水,其作用是
A. DNA溶解于水
B.血细胞破裂,DNA释放
C.稀释血液,防止凝固
D. 有利于搅拌;3. 若选择的实验材料为植物细胞,破碎细胞时要加入一定量的洗涤剂和食盐,加入食盐的目的是
A. 利于DNA的溶解
B. 分离DNA和蛋白质
C. 溶解细胞膜
D. 溶解蛋白质;4. 在DNA粗提取实验中,向在溶解DNA的NaCl溶液中,不断加入蒸馏水的目的是
A.有利于溶解DNA
B.有利于溶解杂质
C.减少DNA的溶解度
D.减少杂质的溶解度;5.DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成( )
A.砖红色 B.橘黄色 C.紫色 D.蓝色;7、欲??溶有DNA的2mol/L的NaCl溶液中的DNA析出,最有效的办法是
A 加蒸馏水 B 加矿泉水
C 加清水 D 加生理盐水
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