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第 2 9 卷 , 第2 期 　 　　　　　　　　　　　光 谱 学 与 光 谱 分 析 Vol 29 ,No2 ,pp 530535 2 0 0 9 年 2 月 　　　　　　　　　　　 　Sp ect ro scop y and Sp ect ral Analy si s February , 2009 　 微量含硒蛋白检测技术进展 刘 　琼 , 彭 　珍 , 梁雪莹 深圳大学生命科学学院 , 广东 深圳 　518060 摘 　要 　生物必需微量元素硒在体内主要通过硒蛋白发挥作用 , 因此微量含硒蛋白的高灵敏检测和识别是 验证生物信息学所预测的硒蛋白和开展硒蛋白组学研究的重要手段 , 也是硒蛋白功能研究的先决条件 。文 章重点介绍了近年迅速发展的激光剥蚀电感耦合等离子体质谱技术原理及其对凝胶电泳分离后蛋白质硒的 检测 , 简要综述了凝胶电泳分离后其他质谱技术在含硒蛋白分析鉴定中的应用 , 包括毛细管高效液相色谱/ 纳升高效液相色谱电感耦合等离子体质谱对含硒多肽的分离检测 、基质辅助激光解吸离子化飞行时间质 谱对含硒蛋白的识别 、以及纳升高效液相色谱电喷雾串联质谱对含硒蛋白的鉴定等内容 , 指出了微量含硒 蛋白检测中存在的问题和发展方向。 关键词 　硒蛋白; 激光剥蚀 ; 电感偶合等离子体 ; 质谱 ; 高效液相色谱 中图分类号 : O6573 　　文献标识码 : A 　　DOI : 103964/ ji ssn(2009) 在蛋白质组学中普遍使用的凝胶电泳 , 由于其高分辨率 , 结 ( 引　言 合近年迅速发展的微量进样系统和高灵敏度检测器 如 L A ICPM S 、Nano H PL CICPM S 和 Cap H PL CICPM S) , 越来 　　生物微量元素硒在过去的几十年中一直受到研究者广泛 越多地应用于硒蛋白研究 , 其中L AICPM S 不仅有望替代 关注[ 1 , 2 ] , 原因是过量硒具有毒性[35 ] 、而适量硒则具有营养 传统放射 自显影技术 , 而且由于其取样微量 , 在对凝胶中蛋 作用[68 ] , 尤其是对癌症的预防功能[911] 。硒在体内主要通过 白质进行硒定量分析后 , 蛋白质条带或斑点中余下部分还可 硒蛋白发挥作用 。近年随着生物基因组序列不断增多 , 人们 用于 MALD ITO FM S 和 Nano H PL CESIM S/ M S 进行蛋 采用生物信 息学方法从基 因组序 列预测 了许 多新硒 蛋 白质的识别和测序[2428 ] 。 白[ 1216 ] 。为证实所预测的新硒蛋白和开展硒蛋白组学研究 , 图 1 展示了基于凝胶电泳分离的各种含硒蛋白的分析检 目前迫切需要发展高分辨率 、高灵敏度的微量含硒蛋白分离 测方法和相互关系 。生物样品经二维凝胶电泳分离后 , 可先 检测技术 。本文将着重介绍近年迅速发展的将凝胶电泳与激 ( ) 光剥蚀电感耦合等离子体质谱技术 L AICPM S 相结合的 方法 , 并对毛细管高效液相色谱电感耦合等离子体质谱 (Cap H PL C