深海嗜热菌耐高温Mn-超氧化物歧化酶的性质研究.pdfVIP

现代食品科技 Modern Food Science and Technology 2016, Vol.32, No.9 深海嗜热菌耐高温Mn-超氧化物歧化酶的性质研究 1,2 1,3 1,3 1,3 1,3,4 邓盾 ，张云 ，孙爱君 ，梁甲元 ，胡云峰 （1.中国科学院南海海洋研究所，中国科学院热带海洋生物资源与生态重点实验室，广东广州 510301）（2.中国 科学院大学，北京 100049）（3.中国科学院南海海洋研究所,广东省海洋药物重点实验室，广东广州 510301） （4.南海生物资源开发与利用协同创新中心，广东广州 510301） 摘要：嗜热菌Bacillus sp. SCSIO 15121 是从南中国海沉积物中分离的，本研究从其基因组中克隆了一个编码超氧化物歧化酶的 基因 SODBa3 ，该基因长度为 609 bp，对应着 202 个氨基酸残基。本研究构建pET28a(+)-SODBa3 表达载体，并在大肠杆菌 BL21 (DE3) 中实现了 SODBa3 的可溶性异源表达。本文研究了重组 SODBa3 的酶学性质，最适pH 为 8.0~8.5，最适反应温度为60 ℃，酶活为 3215.6 U/mg。经鉴定，SODBa3 对 CH Cl-C H OH 敏感，但对 H O 不敏感，因此 SODBa3 是一种 Mn 离子特异的SOD。采用圆二色 3 2 5 2 2 谱结合不同温度下酶活的变化研究酶的热稳定性，结果说明 SODBa3 在 40~70 ℃处理 1 h 酶活保持较高的稳定性，在 100 ℃下处理 1 h 剩余酶活为 50%。金属离子耐受性试验表明 5 mM 的Mn2+对 SODBa3 的酶活有促进作用，SODBa3 对乙醇和 DMSO 的耐受性较好， 剩余酶活分别为对照的 112.56±9.77 和 98.55±6.47%，这些结果表明SODBa3 具有较好的工业应用前景。 关键词：深海微生物；Mn-超氧化物歧化酶；枯草芽孢杆菌；高耐热性 文章篇号：1673-9078(2016)9-77-83 DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2016.9.012 Characterization of a Thermostable Manganese Superoxide Dismutase from a Deep-sea Thermophilic Bacterium DENG Dun1,2, ZHANG Yun1,3, SUN Ai-jun1,3, LIANG Jia-yuan1,3, HU Yun-feng1,3,4 (1.Key Laboratory of Tropical Marine Bio-resources and Ecology, Guangdong Key Laboratory of Marine Materia Medica, South China Sea Institute of Oceanology, Chinese Academy of Sciences, Guangzhou 510301, China) (2.University of Chinese Academy of Sciences, Beijing 100049, China) (3.Guangdong Key Laboratory of Marine Materia Medica, South China Sea Institute of Oceanology,