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GEHealthcareLifeSciences试剂耗材质量调查表尊敬的客户您好.doc
GE Healthcare Life Sciences 试剂耗材质量调查表
尊敬的客户,您好:
感谢您选用了GE Healthcare的产品。为了便于我公司尽快解决您在实验中遇到的问题,请您详细填写如下表格,并以附件形式发送至 lifesciences@, 我们会在一个工作日之内给您回复。
谢谢您的配合!
一. 客户信息
客户姓名: 何亮 工作单位: 山东鲁南制药 职务: 电话/手机: E-mail: helig5010@126.com
二. 产品信息
产品英文名称: Pharmalyte 3-10 for IEF 产品货号. #:17-0456-01 Lot. #: Pack. #:Label No:s1-3388-oo-ee Expiry date:manf.2008-05 当地供应商名称: 订货时间: 2009-02-22 到货时间: 2009-03-06
三. 实验方法
1 您在实验中遇到了什么问题?和预期的结果相比有什么差别?
使用该两性电解质进行等点聚焦电泳,靠近阳极的(低等电点)marker及样品的条带跑不出来(注:marker购自GE Healthcare,商品名:Amersham Isoelectric Focusing calibration Kit Broad pI 3-10,货号:17-0471-01,expiry:18 SEP 09),pI 5.2以下的条带跑不出来。
2 请详细写明您的具体实验操作步骤:
该试验采用BIO-RAD MODEL 111 MINI IEF Cell电泳槽及BIO-RAD Power Pac universal 500w,2.5A电泳仪,胶支持膜GE Healthcare的CELLOPHANE SHEET(货号:80-1129-38)和BIO-RAD的light sensitive Gel support Film(货号:1702983)均有使用。
A:胶配方:丙烯酰胺25%T,3%C 0.660ml
纯水 1.80ml
甘油 0.660ml
Pharmalyte 165ul
过硫酸铵 5ul
核黄素 16.5ul
TEMED 1u
以上混合均匀后迅速灌胶,荧光灯下聚合1h
B:点样 marker及样品点样量 2ul 点样5min后进行电泳
C:电泳条件 BIO-RAD MODEL 111 MINI IEF Cell电泳槽(5cm)
100V 15min
200V 15min
450V 60min
D:染色 常规靠马斯亮蓝染色或者银染。 3 请尽量以图片或数据形式写明您的实验结果 (请保证图片足够的清晰度):
注:用Pharmalyte 3-10作为两性电解质
注:用Pharmalyte 3-10作为两性电解质80-1125-87),GE 支持膜,sliver stain,其他条件与上面一致。(该两性电解质为实验室06年购买的贵公司产品,虽然条带都跑出来了,但是靠近阳极的条带没有分开,并且在电泳快结束时可以看到胶面上有一条台阶状痕迹,而低pI的marker都聚集在这条痕迹附近)
下面两张图为使用BIO-RAD的biolyte两性电解质(pI3.7-9.3)做出来的胶,实验条件除了该两性电解质不一样,其他条件均与上例一致
A B C
coomassie Blue R-250 stain
C
Sliver stain
用该两性电解质可以很好的将Marker(marker与上一致)跑出来
4 您在实验中是否设置了阳性对照?如果有的话结果如何?请以图片或数据形式写明。
上图中B为已知pI样品,pI范围在5.85-6.55
5 您是否进行了重复实验?重复的次数是多少?
用BIO-RAD的做过很多次,使用以前的amploline做了4次,结果感觉分不开,所以购买了现在的pharmalyte,用新的pharmalyte做过6次,结果均与上图示例一致。
6 您在实验中是否用到了其他供应商提供的关
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