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HPLC法测定大鼠肝微粒体中UGT酶的底物.pdf
成都医学院学报 2014年第 9卷第 2期 JournalofChengduM dic college，2014，Vo1．9，No．2
网络出版地址 ：http：／／www．cnki．net／kcms／detail／51．1705．R1420．003．html
doi：10．3969／j．issn．1674—2257．2014．02．003
· 论 著 ·
HPLC法测定大鼠肝微粒体 中UGT酶的底物
洪丽霞，吕红霞，石 明芯，王佳慧，代晶
(成都医学院药学院，成都 610083)
【摘要】 目的 建立测定大 鼠肝微粒 中UGT酶底物 的HPLC方法 。方法 选择对硝基酚、对 乙酰氨基酚作
为 UGT的特异性底物 。采用高效液相色谱法 ，分别 以非那西丁、咖啡因作为 内标 ，色谱柱为 WelchromC18，体积
流量为 1mL／min，柱温为 3O℃。对硝基酚和对 乙酰氨基酚的流动相分别为 乙腈一0．01mol／L的醋酸铵缓冲液(pH
5．00)=35：65和乙腈一水一14：86，对应的检测波长分别为 316nm和 244nm。结果 对硝基酚和对 乙酰氨基酚
在 0．5～100t~mol／L范围内，线性关系 良好 。对硝基酚 的Et内精密度和 日间精密度 RSD 14．7％，方法 回收率
为 89．9 ～l11．0 ，提取回收率86．5 。对乙酰氨基酚的日内精密度和 日间精密度 RSD 13．0％，方法回
收率 105．6 ～114．2％，提取 回收率78．3 。结论 两组方法灵敏、简便、准确 ，可用于大 鼠肝微粒体 中UGT
酶活性 的测定 。
【关键词】 高效液相色谱法；尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶；对硝基酚；对乙酰氨基酚；肝微粒体
【中图分类号】 R969．2 【文献标志码】 A
DeterminationofUGTSubstratesinRatsLiverMicrosomesbyHPLC HONG Li—xia，LV Hong—xia，SHIM ing—
xin，WANGJia—hui，DAIJing (SchoolofPharmacy，C^engduMedicalCollege，Chengdu610083，China)
[Abstract] 0bjective ToestablishaHPLCmethodforthedeterminationofUGT substratesinisolatedrat
livermicrosomes．M ethods P—nitrophenolandacetaminophenwerechosenasUGT substrates，withphenacetinand
caffeineasinternalstandards，respectively．Thedeterminationwasperformedon aWelchrom C18 column，with
mobilephaseofp-nitrophenolwasacetonitrile-0．01mol／L ammonium acetate (pH 5．00= 35 ：65，and for
acetaminophenwasacetonitrile—water 14 ：86．Theflow ratewas1mL／min．DetectionwavelengthofP—
nitrophenolandacetaminophenweresetat316nm and244nm．Thecolumntemperaturewas30℃ ，andinjection
volumewas20uL．Results Thelinearrangesofp-nitrophenolandacetaminophenwere0．5-100 l／mol／I．The
intra—andinter-assayprecisionsofp-nitrophenolwerelessthan14．7％，theassayrecov
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