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SEM应用范围与样品制作
扫描电子显微镜是一种多功能的仪器、具有很多优越的性能、是用途最为广泛的一种仪器.它可以进行如下基本分析:
1、三维形貌的观察和分析;
2、在观察形貌的同时,进行微区的成分分析。
例如:
观察纳米材料
进口材料断口的分析
直接观察大试样的原始表面,
观察厚试样,其在观察厚试样时,能得到高的分辨率和 最真实的形貌。 ;观察试样的各个区域的细节。
在大视场、低放大倍数下观察样品,用扫描电子显微镜观察试样的视场大。
进行从高倍到低倍的连续观察,放大倍数的可变范围很宽,且不用经常对焦。
观察生物试样。
进行动态观察。
从试样表面形貌获得多方面资料,在扫描电子显微镜中,不仅可以利用入射电子和试样相互作用产生各种信息来成象,而且可以通过信号处理方法,获得多种图象的特殊显示方法,还可以从试样的表面形貌获得多方面资料。
;SEM样品的制作;SEM的优点;SEM的缺点;原生动物细胞结构的扫描电镜标本制备方法;1.2 扫描电镜标本的制备
基本步骤为:
1、在体视显微镜下,用微吸管吸取纤毛虫置于含有固定液的固定缸中固定5 min;
2、用0.1 mol/L PBS缓冲液清洗3次,每次约5 min,以除去固定液;
3、使用30% 、50% 、7O% 、90% 、100%的梯度乙醇脱水,每级梯度处理10min;
; 4、样品经由的无水乙醇/醋酸异戊酯(1:1)的混合液过渡并转入纯醋酸异戊酯,每次约10 min,以置换酒精;
5、按“进气一浸泡一置换(3次)一升温一放气”等步骤进行CO2临界点干燥(约4 h);
6、借助体视显微镜,将干燥后的样品转移到铜台上,置于离子溅射仪中,抽真空20 min,喷金10min。
;1.3 制备扫描电镜样品时的注意事项;3、临界点干燥也是决定样品质量的关键一步。用醋酸异戊酯为过渡液,让其与CO2 混合后最终被排尽.使临界状态下细胞表面张力为零而具有饱满的形态 ,但干燥不彻底 导致细胞黏合成团的样品是不能继续进行到下一步的;
4、扫描电镜观察照相时,一般是调好焦距先观察显示细胞的整体形态,在照相时应将细胞放大到较高倍率后再调低到适当倍率,拍摄所要的细胞结构,这样能对细胞冈像进一步精确聚焦。;2 结果与分??
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