miR-29a促进小鼠子宫内膜的蜕膜化.pdfVIP

第 37卷 第 1期 中山大学学报(医学科学版) Vo1．37 No．1 2016年 1月 JOURNALOFSUNYAT-SENUNIVERSITY(MEDICALSCIENCES) Jan． 2016 · 基础研究 · miR一29a促进小鼠子宫内膜的蜕膜化 张 鹏 ．范立青 1,2 (1．中南大学生殖与干细胞工程研究所；2．中信湘雅生殖与遗传专科医院，湖南长沙 410078) 摘 要：【目的】探讨微小RNA29a(miR一29a)在小鼠子宫内膜基质细胞(ESC)蜕膜化中的作用。方【法】收集孕第 1-9 天(D1～D9)的小鼠子宫，通过实时定量PCR(qRT—PCR)的方法检测小鼠子宫组织中miR一29a的表达；构建去除卵巢及其甾 体激素的处理模型，观察甾体激素对miR一29a表达的影响。采用雌二醇(E：)和孕酮(P4)对分离培养的小鼠子宫内膜基质细 胞进行蜕膜化处理，并通过瞬时转染的方法下调miR一29a的表达，分别收集蜕膜化处理不同时间及干扰前后 的细胞，采用 qRT—PCR检测催乳素相关蛋白(dPRP)mRNA的表达 ，Westernblot法检测细胞周期蛋白D3(cyclinD3)、孕酮受体 (PR)蛋白 的表达。 结【果】在小鼠妊娠第 1～5天，子宫组织中的miR一29a表达量较低，随着蜕膜化的进程(妊娠第6-9天)，miR一29a 的表达量均显著性增加(与妊娠D1相 比)；在去除卵巢及其甾体激素的处理模型中，一旦给予雌孕激素刺激，miR一29a的表 达量显著增加：在小鼠子宫内膜基质细胞体外诱导蜕膜化过程中，qRT—PCR结果显示dPRPmRNA的表达以及 miR一29a的 表达随着蜕膜化时间的延长逐渐升高 (与24h相比)，Westernblot法显示蜕膜化标志分子cyclinD3、PR的表达也随着蜕膜 化时间的延长逐渐升高；转染下调miR一29a后，蜕膜化标志分子及miR一29a的表达也相应下降。 【结论】妊娠早期miR一29a 表达于母胎界面．且受子宫内膜蜕膜化的影响，说明miR一29a具有促进子宫内膜蜕膜化的作用。 关键词 ：miR一29a；基质细胞 ：蜕膜化 ；孕酮 ；雌二醇 中图分类号 ：R392—33，R711．51．R321．3 文献标志码：A 文章编号 ：1672—3554(2016)01～0001—08 n ir．29aPromotesEndometrialDecidualizationinM ice ZHANGPeng，FAN li-qing， (1．InstituteofReproductiveStemCellEngineering，CentralSouthUniversity，Changsha410078，China； 2．Reproductive＆GeneticHospital，CITIC—XIANGYA，Changsha410078，China) Correspondingto：FANli-qing，E·mail：fanliqingszzx@sina．com Abstract：O【bjective】ToexploretheeffectofmicroRNA-29a(miR2·9a)inmouseendometrialstmmalcells(ESC)duringthe deciduaprocess．M【ethods】Tocollectuterusofmouse，whichwerepregnantfor1-9d，detectingthemiR2·9aexpressioninuterine tissueofmicebyreal-timequnatitativePCR(qRT-PCR)．TheeffectsofsteroidhormonesontheexpressionofmiR一29abyconstructinga mousemodelofovarieetomizedand