NADPH氧化酶及其检测方法的研究进展.pdfVIP

盛鳌匡堂堕堂报204年箜 鲞箜6期 Journal0fChengduMedicalCollege，2014，Vo1．9，No．6 网络出版地址 ：http：／／www．cnki．net／kcms／detail／51．1705．R0846．008．html doi：10．3969／j．issn．1674—2257．2014．06．030 · 综 述 · NADPH氧化酶及其检测方法的研究进展* 邓 碧，马松涛 成都医学院 药学院(成都 610500) 【关键词1 NADPH氧化酶 ；ROS；检测方法 【中图分类号】 R543 【文献标志码】 A NADPH氧化酶是一种与胞浆膜相关的多酶复 p67phox、小 GTPase和 Rac形成复合体 RhoGDI存 合物 ，主要分布在胚层来源 的细胞 中，其 以胞质 在于细胞质 中，p22phox和 gp91phox以异二 聚体 NADPH为电子供体 ，催化胞外的O生成超氧 阴离 cytb558存在于细胞膜中，其中gp9lphox存在一系 子 (o )。NADPH 氧化酶最早在吞噬细胞 中被发 列 同系 物，分 别 为 N0Xl、NOX2(gp91phox)、 现，由 gp9lphox、p22phox、p47phox、p67phox、 NoX3、NOX4、NOX5、DUOX1、DUOX2，统称 为 p4Ophox和 Rac6种亚基组成 。后来在非吞噬型细 NOX蛋 白家族 。按照结构的不同(图 1)，可将其分 胞 ，如 成 纤 维 细 胞 (fibroblasts)、内皮 细 胞 为 3组 ：NOX1～4：结构 中包含部分伸 向胞浆的 C (endothelialcells)、血 管 平 滑肌 细胞 (vascular 末端和疏水跨膜 区 N 端 ，C端包 含 NADPH一和 smooth muscles，VSMC)、肾 小 球 系 膜 细 胞 FAD一结合位点，N端有 6个保守的跨膜区，其 中在 (mesangialcells)、肾小管细胞 (renaltubularcells) 第 3个和第 5个跨膜 区各有 2个结合亚铁血红素的 中发现有类似吞噬细胞型的NADPH 氧化酶 。由 保守氨基酸残基；NOX5：其结构 除了NOX1～4的 于 NADPH氧化酶生成的低量 ROs可作为第二信 结构域外 ，在 N末端有 4个 EF手结构域，为 Ca抖 使影 响氧化 还原敏感 信号通路 (redox-sensitive 结合位点 ；DUOX氧化酶：包含 NOX1～5结构 (与 signaltransductionpathways)。当 NADPH 氧化 N0X5不 同的是其含有 2个 EF手结构)，在 N末端 酶的活性上调时 ，大量生成的ROS可导致氧化应激 有类超氧化物酶样区域。 的形成。动物模型和人体研究发现 ，在炎症、高血 压、糖尿病 、动脉硬化和阿尔茨海默病等疾病 中， 2O 20 、．· ＼ NADPH 氧化酶介导 的 ROS过度产生是这些疾病 2e 的重要发病机理 。NADPH氧化酶及作为第二信使 Cell 的 ROS在临床疾病的预防 、诊断和治疗 中有重要意 membrane 义。目前对其常用的检测方法有分光光度法 、化学 发光法 、荧光光度法和电子 自旋共振法，但其原理和 检测结果均有一定差异 。因此，本文就 NADPH 氧 化酶 的相关研究进展及活性检测方法综述如下。