NF-κB信号通路差异分析.pdfVIP

∞2(嘴中国茔 科 医学 磕 糍_1_8黪 蝴 ·4261· · 中 医 ·中西 医结 合研 究 · 不 同证候噎膈患者血清调控食管癌 EC9706细胞 PI3K／Akt／NF—KB信号通路差异分析 贾永森，林 清，秦丽娟，张艳丽，刘春秋，江春花，闰 昕，曹慧娟 【摘要】 目的 通过研究噎膈血瘀证、脾气虚证患者及健康人血清对食管癌EC9706细胞增殖、磷脂酰肌醇 3一激酶 (PI3K)／蛋 白激酶 B (Akt)／核因子 kappaB (NF—KB)信号通路相关分子mRNA及蛋 白表达的调控，探讨 噎膈血瘀证、脾气虚证的分子机制。方法 本研究于2014年 6—12月选择来源于唐山市人民医院、迁安燕山医院肿瘤 内科的病理确诊的食管鳞癌患者。按照 《中华人民共和国中医药行业标准—— 中医病症诊断疗效标准》确定噎膈血瘀 证或脾气虚证标准，选取血瘀证、脾气虚证患者各 10人，另选取健康志愿者 1O人 (来 自两院体检人员)。将EC9706 细胞于37℃，5％饱和湿度的二氧化碳 (CO)培养箱孵育24h，饥饿24h，分别加入倍比梯度的噎膈血瘀证、脾气 虚证患者和健康人血清，噻唑蓝 (MTr)染色法检测细胞增殖变化；实时荧光定量聚合酶链反应 (PCR)检测 PI3K、 Akt、NF—kB表达；免疫印迹 (Westernblot)法检~1PI3K／Akt／NF—KB信号通路相关分子蛋 白表达。结果 血瘀证患 者血清刺激细胞的50％增 殖率为 71．1ixl／ml，脾气虚证为 ll8．0~l／ml；血瘀证患者血 清上调细胞 PI3K、Akt和 NF—KBmRNA表达水平，与各对照组比较差异有统计学意义 (P0．05)，脾气虚证患者血清无上调mRNAs作用；血 瘀证患者血清促进细胞表皮生长因子受体 (EGFR)、PI3K、Akt、磷酸化的蛋白激酶B (P—Akt)和 NF—KB等蛋白表 达水平增高，与各对照组比较差异有统计学意义 (P0．05)，脾气虚证患者血清无促进此五蛋白表达作用。结论 噎 膈血瘀证患者血清能够促进细胞增殖，该证候的分子机制可能与PI3K／Akt／NF—KB信号通路过度激活有关；脾气虚证 患者血清无刺激细胞增殖作用，其证候分子机制有待探讨。 【关键词】 食管肿瘤；血瘀证；脾气虚证；血清；EC9706细胞 【中图分类号】R735．1 f文献标识码】A d0j：10．3969／j．issn．1007—9572．2015．34．027 贾永森，林清，秦丽娟，等 ．不同证候噎膈患者血清调控食管癌EC9706细胞PI3K／Akt／NF—KB信号通路差异分 析 [J]．中国全科医学，2015，18(34)：4261—4265．[WWW．chinagp．net] JiaYS，LinQ，Qin J【，eta1．Regulationofserafrom esophagealcancerpatientswithdifferentsyndromesoncell proliferationandPI3K／Akt／NF—KBsignalingpathway0fesophagealcarcinomaEC9706cells[J]．ChineseGeneralPractice， 2015，18 (34)：4261—4265． Regulation of Sera From Esophageal Cancer Patients W ith Different Syndromes on Cell Proliferation and PI3K／Akt／NF—KBSignalingPathwayofEsophagealCarcinomaEC9706Cells JIAyong—sen，LIN Qing，QINLi一 。n，eta1．Collegeof TraditionalChineseMedicine，North China University of Scienceand Technology，Tangshan 063000，China 【Abstract】 Objective ToinvestigatethemolecularmechanismsofBlood—StagnationSyndrome(BSS)andspleen— Qi—dificien