NIBP在结肠癌细胞中通过调控NF-κB信号通路促进MMP2、MMP9表达.pdfVIP

l752 实用医学杂志2015年第31卷第 11期 NIBP在结肠癌细胞中通过调控 NF—KB信号通路 促进MMP2、MMP9表达 徐春燕 黄杰安 覃蒙斌 彭鹏 梁梦紫 李倩 陈楚杰 摘要 目的：观察慢病毒介导的NIBP(NIKandIKKI~bindingprotein)基因转染结肠癌细胞株 HT29后 ． 细胞迁移能力以及细胞内p65、MMP2、MMP9mRNA和蛋白表达的变化。方法：分为未经转染的HT29细胞 (HT29组)、转染空载 的HT29细胞 (HT29一NC组)和转染 NIBP的 HT29细胞 (HT29一NIBP稳转组)。采用 Transwell试验检测细胞迁移能力；Q—PCR法检测 NIBP、p65、MMP2、MMP9的mRNA表达 ：WesternBlot法 检测NIBP、p65、磷酸化 p65(p-p65)的蛋 白表达 ；ELISA法检测 MMP2、MMP9的分泌。结果：高表达 NIBP 能增强结肠癌细胞株 HT29的迁移能力，并主要通过增加 P—p65从而促进MMP2、MMP9mRNA及蛋白表 达 (P0．05)。结论 ：NIBP可能通过激活 NF—KB信号通路促进结肠癌细胞分泌 MMP．2、MMP．9，从而促进 结肠癌细胞 的侵袭转移 关键词 NIK与 IKKB结合蛋 白； NF．KB信号通路 ； MMP2； MMP9 NIBP regulatescolon cancercellexpressM MP2 and M MP9 via NF-KB signaling pathways XU Chun— yah，HUANGJie—olt，QINMeng-bin，PENGPeng，LIANGMeng-zi，LIQi帆，CHENChu-jie． Departmentof Gastroenterology，FirstAffiliatedHospital，GuangxiMedicalUniversity，Nanning53oo21 China Correspondingauthor：HUANG Jie—an E—mail：1404991727@qq．con A【bstract】 Objective ToobserveaftertheNIBP(NIKandIKKbetabindingprotein)genetransfected intocolon cancercelllinesHT29， themigrationofcellsandexpressionofp65， MMP2， MMP9 mRNA and proteins．Methods Theexperimentalgroup：dividedintowithouttransfectionHT29cell (HT29group) and transfectionno-loadHT29cell(HT29一NCgroup)andtransfectionNIBPHT29cell(HT29一NIBPsteadygroup)． UsingtheTranswelltesttodetectcellmirgationability．Q—PCRmethodtodetectthemRNAexpressionsofNIBP。 p65，MMP2，MMP9．WesternBlotmethodtodetecttheexpressionsofNIBP，p65，phosphorylationp65(p-p65) proteins．ThemethodofELISAwasusedtodetectthesecretionofmatrixmetalloproteinase(MMP)一2，MMP一9． Results The high expression ofNIBP may enhance the migration ability ofcolon cancercelllinesHT29， increasingtheexpressionofp-p65， MMP2， MMP9mRNAandproteins (P0．05)．Conclusion NIBP pot