蒸馏吸收.PPTVIP

X：样品蛋白质含量 （g/100g 或g/100mL） V1、V2：测定用样、试剂空白消耗盐酸标准溶液的体积 （mL） C：盐酸标准液的摩尔浓度 （mol/L） 0.014：1mol/L盐酸标准液1mL相当于氮的克数 m：样品质量（g）或体积（mL） F：蛋白质换算系数6.25 作业 实验报告的撰写： 实验题目 实验原理 实验结果 （空白滴定的结果可以共享） 实验讨论 （操作中现象的出现原因；结果的影响因素；与商标 上显示的结果对比等。） 结果每个小组可以相同，但是讨论不能相同！ * * 蛋 白 质 含 量 的 测 定 —微量凯氏定氮法 王冬亮 讲师wdliang@mail.sysu.edu.cn 二、实验原理： 1. 氮元素： 蛋白质区别于糖和脂肪的特征， 绝大多数蛋白质的氮元素含量相当接近，一般恒定在15～17%，平均值为16%左右。 只要测定出生物样品中的含氮量，再乘以相应的蛋白质换算系数（均值为6.25、乳制品为6.38），就可以计算出样品中的蛋白质含量。 消化 蒸馏 吸收 滴定 2. 含氮量的测定 先高温条件下强酸(浓H2SO4)把样品中的蛋白质的有机氮全部消化为无机氮形式 再强碱高温水蒸气蒸馏出氨气 用硼酸吸收氨气 用标准盐酸进行滴定 反应方程式 （二）蒸馏、吸收 微量凯氏定氮蒸馏装置 传统装置 1：电炉 2：水蒸气发生器 3：螺旋夹 4：小玻杯及棒状玻塞 5：反应室 6：反应室外层 7：橡皮管及螺旋夹 8：冷凝管 9：蒸馏液接收瓶 三、试剂(已制备) 1、消化液：硫酸 2、催化剂：硫酸铜、硫酸钾 3、碱溶液：40%氢氧化钠 4、吸收液：2%硼酸 5、混合指示剂： 0.1%甲基红乙醇溶液：0.1%甲基蓝乙醇溶液=（1：1） 6、标准滴定液：0.2M HCL 半自动凯氏定氮仪 1、确保仪器运行正常、管道内部干净、管道及其连接口密封性好 2、准备好吸收液（200ml 2%硼酸 + 2ml 混合指示剂）并做好标记 3、将碱溶液及去离子水桶与仪器连接好，放入盛装消化好样品的消化瓶，放入盛装吸收液的锥形瓶并保证管口插入液面下。 4、设置并启动程序 程序设置： 4min E3 10s E3（加水） C3（试验结束后第二次清洗） 0min E2 20s E2（加水） C2（试验结束后第一次清洗） 2min E1 0s E1 C1（样品间清洗） 4min E0 5s E0（加碱） C0（样品检测) 时间 蒸馏 时间 加碱或加水 步骤 （三）滴定： 至灰色或蓝紫色 至灰色或蓝紫色 终点 至灰色或蓝紫色 五、结果计算: * * *