分子生物学考试重点绝对是考点你懂得.docVIP

分子生物学主要内容复习2011-6 荧光标记的为重点看的。 名词解释看： 启动子（第1章课件）、增强子（第1章课件）、反义RNA（第一章课件上老师补充）、基因组(P20)、Alu序列(P23)、卫星DNA(第2章课件上，老师补充)、引发体(P33)、转录泡（P60）、操纵子（考研书-生化篇，基因表达调控），核酸分子杂交、PCR、基因组文库、cDNA文库。 真核生物第十一章 细胞异常增生性的分子机制 1.? ??? 反转录病毒中一些能在体外转化细胞，在体内使宿主患肿瘤的基2.? 细胞癌基因（正常宿主细胞中与病毒癌基因同源的基因，往往编码生长因子或其他信号转导分子，为细胞生长所必需；只有特定条件下被活化后才有致癌性，又称为原癌基因。 3.? 抑癌基因（一类编码产物起抑制细胞增殖信号转导、负性调节细胞周期的作用，从而抑制细胞增殖和抑制肿瘤生成的基因。） 4.? 细胞凋亡（在生理或病理状态下，由细胞内特定基因的程序性表达而介导的细胞死亡。） 5. 原癌基因活化的机理。原癌基因的活化机制包括 (1)?? 点突变； (2)?? DNA重排； (3)??? 基因扩增(4)?? 染色体易位； (5)??病毒启动子及增强子的插入。活化后，基因编码产物的结构和功能发生变化和（或）表达的量增加，导致细胞增殖信号增强。 6.以p53为例说明抑癌基因的调控功能抑癌基因的表达产物起着抑制细胞增殖信号转导、负性调节细胞周期的作用，从而抑制细胞增殖(1)p53蛋白与p300/CBP结合，促进靶基因p21和GADD45转录，阻止细胞通过G1-S检验点，进行基因修复(2)促进BAX、IGF－BP3（胰岛素样生长因子结合蛋白3）及FAS基因的转录，促进细胞凋亡。 7. 简述Rb的作用机制(1)?Rb基因是发现的第一个抑癌基因，编码产物定位于细胞核，含有病毒蛋白和细胞蛋白的结合位点及磷酸化位点(2)低磷酸化的pRb结合并灭活E2F1，细胞不能通过G1-S检验点(3)高磷酸化的pRb不结合E2F1，相关基因表达，细胞进入S期(4)? Cyclin D1-CDK4复合体使pRb磷酸化程度增加。 ?1．基因克隆（指把一个生物体中的遗传信息（基因片段）转入另一个生物体内进行无性繁殖，得到一群完全相同的基因片段，又称为DNA克隆） 2．基因组文库（指含有某种生物体全部基因片段的重组DNA克隆群体。即将原核或真核细胞染色体DNA提纯，用机械法或限制性内切酶将染色体DNA切割成大小不等的片段，插入适当的克隆载体中，继而转入受体菌扩增，由此获得含有众多克隆的基因组DNA文库。） 3．cDNA文库（指含有某种组织细胞全部mRNA信息的重组DNA克隆群体。以细胞总mRNA为模板，利用逆转录酶合成与mRNA互补的cDNA第一链，进而形成cDNA双链，与合适载体连接后转入受体菌扩增，由此建立cDNA文库。） 4．基因剔除（指通过基因同源重组定向地从活细胞的基因组中移除特定基因的过程，是通过loss of function途径研究基因功能的重要手段） 5．RNA干扰（由短双链RNA诱导同源RNA降解的过程，是一种特异的转录后基因沉默现象，可以认为是生物体在核酸水平的免疫反应。） 6．Southern印迹（是DNA定性及定量分析的方法之一，过程为 提取细胞中的总DNA，用限制性内切酶水解后进行电泳，并转移到硝酸纤维素膜上，用DNA探针与结合在膜上的DNA分子退火形成双链，检测靶DNA的含量。） 7．Northern印迹（是RNA定性及定量分析的方法之一，过程为 将细胞中的总RNA分子进行电泳分离，并转移到硝酸纤维素膜上，用DNA探针与结合在膜上的RNA分子退火形成双链，检测靶RNA的含量。） 8．反转录PCR（提取细胞总RNA作为模板，由逆转录酶催化生成cDNA。再以cDNA为模板，由一对特异性引物引发，在Taq DNA聚合酶作用下，通过变性、复性、延伸三步循环，复制生成大量双链DNA片段的过程） ?1什么叫载体？载体应具备哪些条件？载体是指能够携带目的基因在宿主细胞内扩增或表达的DNA分子，应具备的条件(1)?有复制子(2)?有单一限制性内切酶位点(3)?有筛选标志(4)?表达型载体具备完整的转录单位。 2．基因克隆的基本过程是什么 (1)获得目的基因。 (2)?限制性内切酶消化载体。 (3)?连接目的基因和载体。 (4)重组DNA导入宿主细胞。 (5)?筛选并扩增获得重组克隆 3．原核表达系统与真核表达系统各有何优缺点？(1)? 培养方法简单、迅速、经济，适合大规模生产。(2)原核表达体系的缺点 缺乏转录和翻译后加工机制，表达的蛋白质可能没有生物学活性。(3)?真核表达体系的优点①具有酵母、昆虫以及哺乳动物细胞等多种表达系统。② 具有转录和翻译后修饰系统，