实验十二-水中细菌总数和大肠杆菌检测.pptVIP

一 实验目的 1、掌握细菌总数的测定方法 2、掌握大肠杆菌的鉴定和计数方法 3、巩固无菌操作技术 2 大肠杆菌鉴定原理 大肠菌群：一群能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。该菌主要来源于人畜粪便，故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量，推断食品中有否染肠道致病菌的可能。 样品中大肠菌群系以100mL（g）检样内大肠菌群最大可能数（MPN)表示。 三、实验器材 1、恒温培养箱（36℃±1℃ ）、恒温水浴锅（46℃±1℃ ） 、天平、灭菌培养皿、试管。 2、培养基及试剂： 乳糖胆盐发酵管、伊红美蓝琼脂平板（EMB）、牛肉膏蛋白胨培养基 1、检样稀释 ①以无菌操作将检样1mL放于含有9mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内，经充分振摇或研磨做成1：10的均匀稀释液。 ②用1ml灭菌吸管吸取1：10稀释液1mL，注入含有9mL生理盐水或其他稀释液的试管内，振摇试管混匀，做成1：100的稀释液。 ③另取1ml灭菌吸管，按上述操作依次作10倍递增稀释液。 ④根据食品卫生要求或对检验样品污染情况估计，选择三个稀释度，每个稀释度，接种3管，每支试管接种1ml。 2. 乳糖发酵试验 将待检样品接种于乳糖胆盐发酵管内，接种量在1mL以上者，用双料乳糖胆盐发酵管；1mL及1mL以下者，用单料乳糖发酵管。每一个稀释度接种3管，置36