微生物检验实验讲义2.pptVIP

实验 抗菌药物敏感性试验 目的要求 1．掌握纸片扩散法（K-B法）的原理、操作方法、结果的判读及其临床意义。 2．掌握纸片扩散法的质量控制。 器材和试剂 1．菌种：金黄色葡萄球菌ATCC25923、大肠埃希菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853。 2．培养基：水解酪蛋白琼脂（MH琼脂）。 3．试剂：无菌肉汤、0.5麦氏标准比浊管、抗菌药物纸片。 4．其他：无菌棉拭、镊子、毫米尺、接种环。 步骤和方法 （一）原理 （二）方法 （三）结果 （一）原理 将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种检测菌的琼脂平板上。在纸片周围区域扩散形成递减的梯度浓度，在纸片周围抑菌浓度范围内检测菌的生长被抑制，形成透明的抑菌圈。抑菌圈的大小反映检测菌对测定药物的敏感程度，并与该药对检测菌的最低抑菌浓度（MIC）呈负相关关系，即抑菌圈愈大，MIC愈小。 （二）方法 1.挑取孵育16～24h的血平板上数个菌落置于肉汤管中，校正浓度至0.5麦氏比浊标准。 2.用无菌棉拭蘸取菌液，在试管内壁旋转挤去多余菌液后，在MH琼脂表面均匀涂布3次，每次旋转60°，最后沿平板内缘涂抹1周。 3.室温干燥3~5min后贴抗菌纸片，各纸片中心距离不小于24mm，纸片距平板内缘应大于15mm。 4.平板室温放置15min后倒放于培养箱中培养。 药敏纸片的选择 （三）结果 1.结果判读： 平板置黑色无反光背景上，