一种肝癌特异性GGT的DSA亲和色谱检测方法.pdfVIP

维普资讯 · 533 · · 论 著 · 一 种肝癌特异性 GGT的DSA亲和色谱检测方法 蒋淑莲，王念跃，文 剑，赵 伟，吴引伟 摘【要】 目的 建立一种特异的检测血清中肝癌特异性 一谷氨酰转移酶 (Hs—GGT)的亲和层析方法，并观 察HS—GGT对原发性肝癌 (PHC)的鉴别诊断价值。方法 采集64例PHC、22例肝外肿瘤、68例 良性肝病及21例 正常对照者的血清，以神经胺酸酶 (NMD)水解后直接用欧曼陀罗凝集素 (DSA)亲和层析柱分离，首先用柱平衡液 洗脱不结合组分，再用 50mmol／L醋酸洗弱结合组分，最后用 100mmol／L醋酸洗脱强结合组分 ，用连续监测法测定各 组分中的GGT活性，并分析各组分GGT在PHC鉴别诊断中的价值。结果 DSA强结合组分 中的GGT为PHC患者所特 有，以其在总GGT所 占比例 2％为PHC诊断的Cutoff值，其诊断特异度为95．5％，灵敏度为85．8％，准确度为 92．0％。结论 该方法能较好地鉴别诊断PHC，较其他检测方法更为简便，且同样有着较高的诊断灵敏度和特异度。 【关键词】 亲和层析； 一谷氨酰转移酶；肝细胞癌；欧曼陀罗凝集素 【中图分类号】R446R735．7 【文献标识码】A 【文章编号】1007—9572(2007)07—0533—03 Hepatoma—SpecificGlutamyltranspeptidaseDetectedbyDSA AffinityChromatographyMethod JIANGShu—lian， WANGNian—yue，眦 ⅣJian，eta1．NanjingSecondHospitalAffiliatedtoMedicineCollegeofEasternSouthUniversity，Nanjing 210003，China A【bstract】 Objective Asimplemethodfordetectionofhepatoan—specificgamma— utamyltranspeptidase(HS— GGT)wassetupbyDaturastramoniumagglutinin(DSA)affinitychromatography，anditsclinicalapplicationwasverifiedindif- ferentialdiagnosisofprimaryhepatocellularcarcinoma(PHC)．Methods Serumswerecollectedfrom64patientswithPHC， 22withextrahepatictumor，68withbenignliverdiseasesand21normalcontrols；andthentheywereanalyzedbyDSA —sepha— roes affinitychromatographyafterdigestionbyneuraminidaes．Threefractionswereelutedandcollectedbyequilibrationbuffer． 50mmol／Lacetateand100mmol／Lacetaterespectively．GGTactivityineachfractionwastestedbycontinuousmonitoringmeth- od，andthedifferentialdiagnosticvalueofGGTineachfractionwasassessed，Results DSAstronglyboundGGTII1wasspecif- icinPHCpatients，whentheproportionofGGTIII2％ wastakenasthecutoffvalue，thespecificity，sensitivityandaccuracy ofGGTm indiagnosisofPHCwererespectively95．5％ ．85．8％ and92．0％．Conclusion Themethodwashelpfulofrdiffer- ential diagnos