常用10种培养基的配置和质控标准.docVIP

小结：常用10种培养基的配置和质控标准1） 基础肉汤 成分和配制方法： 蛋白胨 10g NaCl 5g 牛肉膏 5g 酵母膏 3g DW 1L pH 7.4～7.6 15磅30min高压灭菌，倾注无菌试管备用。 每次新配制时做质控 阳性质控：ATCC 25923金黄色葡萄球菌接种基础肉汤中，35℃温箱24h肉汤混浊。 无菌试验：100管抽检5%,100管随机抽取10管未接种的基础肉汤35℃温箱24h培养，无细菌生长。 平行试验：质控时，要求新旧批号的培养基同时做 用途：供培养对营养要求不高的细菌增菌用；作其他选择培养基的基础液。 储存 干粉：室温保存，由于容易受潮，所以开瓶后务必将盖拧紧。 培养基：2-8℃保存一个月 （2）普通营养琼脂 成分和配制方法： 基础肉汤 100ml 琼脂 2g 15磅30min高压灭菌，倾注平板备用。 注：可购买国内生产的瓶装营养琼脂粉，按上面的说明配制。 质量控制： 质控频度 每次新配制时做质控 质控方法 阳性质控：ATCC 25923金黄色葡萄球菌或ATCC25922大肠埃希菌接种营养琼脂上，35℃温箱24h细菌生长良好。 无菌试验：100块抽检5%,100块随机抽取10管未接种的营养琼脂35℃温箱24h培养，无细菌生长。 平行试验：质控时，要求新旧批号的培养基同时做 用途： 供培养对营养要求不高的细菌。 作无糖基础培养基。 加血成血平板。 加血加热75℃以上，再加上生长添加剂就成巧克力平板。 储存 干粉：室温保存，由于容易受潮，所以开瓶后务必将盖拧紧。 培养基：2-8℃保存半个月 （3）葡萄糖肉汤 成分和配制方法： 蛋白胨 10g 朊胨 10g NaCl 5g 牛肉膏 5g 酵母粉 3g 葡萄糖 4g 枸橼酸钠 3g 硫酸镁 3g DW 1L pH 7.2～7.4 0.4%酚红 5ml 15磅30min高压灭菌，备用 质量控制： 质控频度 每次新配制时做质控 质控方法 阳性质控：ATCC 25923金黄色葡萄球菌接种葡萄糖肉汤中，35℃温箱24h肉汤混浊。 无菌试验：100管抽检5%,100管随机抽取10管未接种的葡萄糖肉汤35℃温箱24h培养，无细菌生长。 平行试验：质控时，要求新旧批号的培养基同时做 用途：供培养对营养要求不高的细菌增菌用。 6 储存 干粉：室温保存，由于容易受潮，所以开瓶后务必将盖拧紧。 培养基：2-8℃保存一个月 （4）血液琼脂平板 成分和配制方法：（法国生物梅里埃成品培养基） 4g琼脂基础+100mL蒸馏水 高压灭菌（15磅、121℃）20min 冷却至50℃加入5%-10%无菌羊（兔）血 倾注于无菌平皿内（φ9mm）每一个平皿分装13~15ml。 质量控制： 质控频度 每次新配制时做质控 质控方法 阳性质控：ATCC 6303肺炎链球菌（或质控菌株）和ATCC 25923金黄色葡萄球菌接种于血液琼脂，35℃温箱24h细菌生长良好。ATCC 6303肺炎链球菌为α溶血。ATCC 25923金黄色葡萄球菌为β溶血。 无菌试验：100块抽检5%,100块随机抽取10块未接种的血液琼脂35℃温箱24h培养，无细菌生长。 平行试验：质控时，要求新旧批号的培养基同时做 用途：供分离培养营养要求较高的细菌。 储存 干粉：室温保存，由于容易受潮，所以开瓶后务必将盖拧紧。 培养基：2-8℃保存半个月 注意事项: 制备血平板时，温度必须适宜，琼脂应冷至50℃左右，如温度过高，可使血液变色不易观察溶血，温度过低，琼脂凝固与血液不易混合。 使用的血液以羊血，兔血为好，不宜使用人血，因人血中有抗体、补体不利细菌生长。羊血对链球菌、葡萄球菌的溶血比较满意，但可抑制脑膜炎奈瑟氏菌与嗜血杆菌的生长。 （5）血液琼脂平板（国产） 普通营养琼脂粉 3.8克+100ml蒸馏水 10%葡萄糖 0.6ml 血液 6～10ml 冷却至50℃加入5%-10%无菌羊（兔）血 倾注于无菌平皿内（φ9mm）每一个平皿分装13~15ml。 质控方法 阳性质控：ATCC 6303肺炎链球菌（或质控菌株）和ATCC 25923金黄色葡萄球菌接种于血液琼脂，35℃温箱24h细菌生长良好。ATCC 6303肺炎链球菌为α溶血。ATCC 25923金黄色葡萄球菌为β溶血。 无菌试验：100块抽检5%,100块随机抽取10块未接种的血液琼脂35℃温箱24h培养，无细菌生长。 平行试验：质控时，要求新旧批号的培养基同时做 用途：供分离培养营养要求较高的细菌。 储存 干粉：室温保存，由于容易受潮，所以开瓶后务必将盖拧紧。 培养基：2-8℃保存半个月 注意事项: 制备血平板时，温度必须适宜，琼脂应冷至50℃左右，如温度过高，可使血