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PCR自测题 一、名词解释 1.PCR 2.变性 3.退火 4.延伸 5.逆转录PCR 6.停滞效应 7.共享引物PCR 8.多重PCR 9.反向PCR 10.原位PCR 11.LCR ? 二、单项选择题 1．PCR反应中，所设计引物的长度一般为（ ） A．5～10核苷酸 B. 15～30核苷酸 C. 50个核苷酸 D.长度任意 E. 以上答案均不对 2．引物设计时G＋C含量在引物中一般占（ c ） A.?????? 20～40﹪ B. 30～60﹪ C. 45～55﹪ D.越高越好 E.含量随意 3．以下说法错误的是（ e ） A???????引物中的碱基组成应该尽可能的随机分布。 B???????引物自身不应该存在互补序列 C???????设计引物时应考虑使3‘端引物和5‘端引物具有相似的Tm值 D???????引物的5‘和3’端必须和模板严格配对结合 E????????引物与非特异扩增区的序列的同源性不要超过70﹪ 4．下列说法正确的是（ ） C.?????? PCR反应常用的缓冲液为10－50mmol/L的Tris-HCl（室温 PH 8.3－8.8） D.?????? 10mmol/L的KCl能促进引物的退火 E.??????? 加入的BSA有利于破坏模板的二级结构 F.??????? 二甲基亚砜有利于保护TaqDNA酶的活性。 E. Mg2+能降低Taq DNA聚合酶的活性。 5. TaqDNA聚合酶活性需要以下哪种离子（ c ） A．K+ B. Na+ C. Mg2+ D. Ca2+ E. Cl- 6．适用于DNA序列中单个碱基突变的检测的方法是：( d ) A．筑巢PCR B. 多重PCR C. 锚定PCR D. LCR 7．以下哪种PCR技术广泛应用于组织胚胎学和肿瘤学的研究（ a ） A．原位PCR B．差异显示PCR C．不对称PCR D．反向PCR 8.已知一段设计好的引物的序列为GTGGATCCATGGCTCCTCTGAAGATTC,其Tm值为（ ） A. 78 B. 80 C. 82 D. 84 E. 无法计算 9．以下哪种PCR技术可以克服序列未能全知的障碍而获取目的扩增片段（ c ） A.共享引物PCR B不对称PCR C锚定PCR D.筑巢PCR 10．一位疑似杜氏肌营养不良症的患者，可以采用以下哪种方法协助诊断（ ） A.原位PCR B.多重PCR C.不对称PCR. D. 锚定PCR 11．以下关于dNTP的说法错误的是（ e ） B.????? dNTP具有较强的酸性，使用时应将pH调至7.0-7.5 C.????? PCR反应中，四种dNTP必须按比例配制，以减少反应的错配率。 D.???? dNTP的浓度过高会增加碱基的错配率 E.????? dNTP的浓度低，反应速度下降，但特异性提高 12. TaqDNA聚合酶可以不要模板在ds DNA的末端加上一个( )碱基. A. dGTP B. dCTP C. dATP D. dTTP 13. 有关PCR的描述哪个不对( d ) A.是一种酶促反应 B.引物决定扩增的特异性 C.扩增的对象是DNA序列 A)???? D.扩增的对象是氨基酸序列 14. 催化PCR的酶是 ( c ) A.??????? RNA聚合酶 B.?????????????????????????????????? DNA聚合酶 C.????????????????????????????????? Taq DNA聚合酶 D.????????????????????????????????? 反转录酶 15. PCR产物具有特异性是因为( c ) A.????????????????????????????????? Taq DNA酶保证了产物的特异性 B.?????????????????????????????????? 合适的变性,退火,延伸温度 C.????????????????????????????????? 选择特异性的引物 D.????????????????????????????????? 引物的Tm值不同. 16．LCR的说法正确的是 ( ) A.??????????????????????? 体系中采用DNA聚合酶 B.??????????????????????? 须设计一对引物 C.??????????????????????? 反应需经过变性,复性,连接 D.????????????????????