利用正丙氧基钛制备钛胶HPLC整体柱及影响结构因素探讨.pdfVIP

利用正丙氧基钛制备钛胶HPLC整体柱及 影响结构的因素探讨 ofTitaniaMonolithsforHPLCTitanium Preparation by onthe and oftheEffectFactors n—·PropoxideInvestigation 专 业：食品科学 研究生：周文君 指导教师：姜子涛教授 生物技术与食品科学学院 2011年5月 摘 要 近年来，二氧化钛已经引起了越来越多的关注。它在很多领域都具有自己独特的性质， 但最为引人注目的是它作为色谱填充材料。二氧化钛具有极好的机械强度和化学稳定性， 可以用于大批量样品、大分子化合物(如多肽和蛋白等化合物)的分离分析和食品安全检 测，具有重大意义。本文主要研究了利用溶胶．凝胶方法制备钛胶基质整体材料以及条件优 化，并利用钛胶基质高效液相色谱柱分离蛋白样品。 本课题的研究包括三个部分： (1)采用溶胶．凝胶法合成钛胶整体材料，确定了影响整体材料结构和性能的几个因 素，包括初始混合物中各成分的比例、老化温度以及后续的干燥条件等。通过严格控制实 验中的各个步骤制备出二氧化钛整体材料，并对制各得到的整体材料进行比表面积、孔径、 gEM和XRD等参数的测定。 (2)通过对牛血清白蛋白的胰蛋白酶水解液的单因素实验得出二氧化钛裸柱分离蛋 白的最佳实验条件(用浓度为15mM的磷酸盐缓冲液修饰二氧化钛裸柱，流动相为 离牛血清白蛋白的胰蛋白酶水解液。 (3)通过对牛血清白蛋白的胰蛋白酶水解液的单因素实验得出钛胶基质反相高效液 相色谱柱分离蛋白的最佳实验条件(用浓度为40mM的氟化铵缓冲液及尽可能高ACN含量 的溶液作为流动相)并在四元泵高效液相色谱上采用梯度条件探讨分离蛋白水解液的最佳 方案，得出分离的最佳条件(40raM的氟化铵条件下缓慢梯度变化ACN含量)。 关键词：二氧化钛；整体柱；HPLC；牛血清白蛋白；胰蛋白酶；多肽 ABSTRACT hasdrawn attentioninrecent havebeen Titania increasing years．Itsuniqueproperties indiverse themost isits asa areas，but performance extensivelyexploited strikingproperty material．Titaniahas mechanicalandchemical Canbe chromatographicpacking great stability,it usedinthe of of as separationlargequantitiessamples，macromolecular and thefood a this polypeptideprotein)andsafetytesting,hassignificantmeani