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定量数据分析 化学工作站定量概念 定量过程 设置定量数据资料 定量数据资料表 输入化合物 输入化合物 (续) 内标指令 更新校正表 化合物信息 - 第 1页 化合物信息 - 第 2页 化合物信息 - 第 3页 校正曲线 自动定量数据库 定量报告选项 交叉定量 自动生成定量报告 使用 Qedit手动再积分 修改数据状态 定量数据库故障排除 查找峰/查找所有化合物 EasyID 总校正 工具: DOLIST 用户配置 DOLIST 选项 方法流程 定量分析的主要步骤包括： 了解你所分析的化合物。 建立分析包含该化合物的样品的方法。 分析一个或几个已知该化合物浓度的样品，得到相应的响应值。如果你的检测器有非线性响应，你可以分析含有该化合物的不同浓度的样品，这一过程称为多级校正。 分析包含该化合物的未知浓度的样品，得到相应的响应值。 将未知浓度的该化合物的响应值与已知浓度的该化合物的响应值相比 较，以确定其浓度。 为了使上述比较有效，所有的数据必须在同样的条件下被分析和采集。 定量方式涉及到样品处理步骤和获得定量结果的数据处理过程。化学工作站软件有两种定量方式：外标法和内标法。 当校正样和未知样品在同样的条件下分析时，外标法是基本的定量方法。未知样品的结果与校正样的结果相比较从而计算出未知物的含量。 外标法使用绝对响应因子。响应因子从校正表中得到并可储存。在分析后面的样品时，响应因子被用于计算化合物的含量。使用这种计算方法必须注意一点，即每次运行的进样量必须是一致的。 一个化合物的绝对响应因子就是该化合物的含量除以分析这个校正混合物时该化合物的峰面积或峰高的值。绝对响应因子校正了检测器对不同化合物的响应能力。 每一组分的检测面积除以其已知的含量得到各自的响应因子。 组分的面积乘以响应因子得到其浓度。 内标法采用加入已知含量组份作归一化因子克服了外标法的缺点。这已知组份即内标物在校正标样及未知样品中都须加入相同量。 作为内标的化合物其化学性质和保留时间都应和目标化合物相似。但它必须能按保留时间或 m / z 值来和样品区分。 同位素标记目标化合物是一个理想的内标物，它可以由其离子和目标化合物的M/Z值区别开。 *GC/MS对于第6项不要求。 如果有条件，运用同位素标记化合物做内标物，其化学性质、色谱特性等都与目标化合物一致，因此校正精度更高。 GC/MS定量与GC定量最大的区别在于它先定性后定量。建立一个GC/MS定量数据库，通常要设定目标化合物的保留时间窗口、指定定量目标离子和限定离子（很少用总离子流定量）。用目标离子定量的优点在于可以消除本底干扰并且避免假阳性捡出。加入限定离子更可以消除假阳性捡出的可能性。 外标法的标准曲线横坐标为含量，纵坐标为响应值。 内标法的横坐标为目标化合物含量与内标物含量的比值，纵坐标为目标化合物的响应值与内标物响应值的比值。 Calibrate / Set Up Calibration... 指导单级级别校正曲线的建立。如果在同一数据文件中有多个标准化合物，就可以一次性建立适用于所有标准物的单级级别校正曲线。所有化合物、校正曲线和提取离子参数的信息都储存在“定量数据库中”，作为方法的一部分保存起来。 定量数据库全局参数 (Quantitation Database Globals) 窗口用来编辑在当前的分析 中所有化合物的有关信息。在这儿可以设置定量报告、峰位置、新化合物资料等参数。这些参数设置是针对所有化合物的，但对某具体化合物可以改变设置。 Calibration Title（校准标题）：如果愿意输入一个标题（可选）。这个标题将显示在每个定量报告的标题栏中。 Default Multiplier（缺省的乘数）：在打印报告前，所有未知样品定量计算结果乘以这一给定的乘数。 Default Sample Concentration（缺省的样品浓度）：在打印报告前对未知样品的计算结果要除以这个浓度再乘100。在最后的报告中浓度单位换成 ％，输入 0 值说明在报告中样品浓度用绝对值表示而不是用百分数。 Reference Window / Non-Reference Window（参考峰窗口/非参考峰窗口）：用来确定在定量数据库中指定的峰是否在要处理的数据文件中，单位是 ％ 或分钟。如果设定值是5% 表示要处理的峰其保留时间必须是在定量数据库中保留时间 的 +/- 2.5% 之内。若设置是5 分钟，表示将要处理的峰其保留时间是在定量数据库保留时间的 +/- 2.5 分钟之内。 Reference window 用于作为时间参照（内标物）的峰。在一个完整的色谱图中，参考峰用来校正保留时间的漂移。工作站首先找到参考峰，确定参考峰的漂移，在将这一漂移值用于其他峰。 non-reference wind