柱前衍生化HPLC法测定注射用氨磷汀的含量.pdfVIP

黄滔敏 ，等．柱前衍生化 HPLC法测定注射用氨磷汀的含量 61 氨磷汀 (阿米福汀 ，amifostine，又称 WR-2721)， (上海 Branson超 声 波仪器厂)；MettlerToledo 化学名 S一2一E3一氨丙基胺]乙基硫代磷酸 ，结构式为 SevenEasy型pH计 (梅特勒 一托利多仪器有 限公 NH：一(CH。)3-NH一(CH )一P()3H：，原是冷战期 间 司)；电子天平 (北京赛多利斯仪器系统有限公司， 美国Walter-Reed陆军研究所合成的4000余种放射 Sartorius，d=0．1mg)。 保护剂中最有效 的防护核辐射药物 ，也是美 国FDA 试药 乙腈 (HPLC纯 ，美 国Tedia公司)；注射 批准上市的第一个泛细胞保护剂 ，即广谱 的选择性细 用氨 磷 汀 (大 连 美 罗 大 药 厂，批 号 胞保护剂。它能选择性保护正常器官免受化疗、放疗 规格 ：0．4g／瓶)；氨磷汀对 照品(美 国药 的毒性攻击而不保护肿瘤组织 ，因此能明显改善患者 典对照 品标准 ，批 号 ：FOF075)；氯 甲酸芴 甲酯 对化疗、放疗的耐受性，提高其生活质量。1999年被 (FM0C—C1，Fluka，批号 ：WB11080，含量 ≥99 )； 美国FDA批准用于对抗化疗药肾毒性以及减轻肿瘤 三蒸水 (本实验室 自制)。 患者因放疗引起 的口干症 ]。 色谱条件 色谱柱 ：Agilent C18(150mm × 目前 ，文献报道的氨磷汀的含量测定方法有电 4．6mm，5 m)；流动相 A：乙腈 ，B：水。0～4min， 化学测定 一33、化学发光l4]和 HPLC荧光胺柱前衍 A：B=30：70；4．1～10min，A：B=98：2，每次进样 生化法__5]。电化学和化学发光检测法虽灵敏度较 前再平衡 7min；柱温25℃；流速 1mL／min；检测波 高 ，但易于受到杂质及其他物质 的干扰 。荧光胺柱 长 265nm；进样量 2O肚I。 前衍生化法虽灵敏度较 高 ，但 需要用荧光检测器 。 标准品储备液配制 精密称取氨磷汀标准品25 氨磷汀结构本身并不具有强 的发光基 团，其 HPLC mg，加水溶于25mL量瓶中，配制成标准品储备液。 直接紫外测定法检测波长在 210nm 附近，选择性 供试品溶液配制 精密称取适量注射用氨磷汀 不高且易受到流动相及溶剂性质的影响。我们采用 (约相当于氨磷汀0．05g)置 100mL量瓶中，加水溶解 FMOC—C1对氨磷汀衍生化后 ，其衍生化产物在普遍 并稀释至刻度，摇匀。取上述溶液适量，用水稀释 100 使用的紫外检测器 即可进行测定 ，且测定时流动相 倍，作为注射用氨磷汀供试品溶液(约50~／g／mL)。 配制简单 ，为乙腈和水的混合溶液 ，该反应简便 、快 样品预处理 取氨磷汀供试品溶液 100 L，加 速且适用性更广。 乙腈 100ffL，加硼酸缓冲液 (0．2mol／L，pH=8．0) 100tzL，加衍生化试剂 FMOC—C1(8mmol／L乙腈 材 料 和 方 法 溶液)100 L，漩涡混