橙皮苷对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用.pdfVIP

· 3136 · 广东医学 2014年 10月 第 35卷第20期 GuangdongMedicalJournalOct．2014，Vo1．35，No．20 橙皮苷对 四氯化碳致小 鼠急性肝损伤的 保护作用冰 黄文剑，陈茂剑，孙婷，李刚，聂浩，王超，张燕翔，龚权 长江大学病原生物学部 (湖北荆州434023) 【摘要】 目的 探讨橙皮苷(HDN)预处理对四氯化碳(CC1)所致小鼠急性肝损伤的保护作用及其机制。 方法 将 30只雄性BALB／c小鼠随机分为正常组、CC1组和HDN组。HDN组灌胃HDN(500mg／kg)，CC1组和 正常组灌胃同体积的0．5％羧 甲基纤维素钠溶液，1次／d，连续 14d。末次灌胃后禁食不禁水，2h后 CC1组和 HDN组腹腔注射 CC1(0．3％，10mL／kg)建立急性化学性肝损伤模型，正常组注射相同体积的橄榄油。16h后按 指标检测要求保留标本。测定各组小鼠肝、脾指数，肝组织匀浆丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘 肽 (GSH)的水平，血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶 (AST)、肿瘤坏死因子一 (TNF— )、白细胞介素 一6(IL一 6)和高迁移率族蛋 白B1(HMGB1)的水平；HE染色观察组织病理学改变；RT—PCR法检测小鼠肝组织HMGB1 mRNA的表达水平。结果 与正常组比较，CC1组血清中ALT、AST水平显著升高(P0．01)，肝细胞水肿，脂肪 变性，结构紊乱，肝细胞明显肿胀变形，有点状、片状坏死及 炎性细胞浸润，MDA含量明显升高(P0．01)，SOD和 GSH活性明显降低(P0．o1)，血清中TNF一0【和 IL一6的水平显著升高(P0．01)，HMGB1的表达与释放 明显 增强 (P0．01)。与CC1组比较，HDN组血清中ALT、AST水平显著降低(P0．01)，肝组织损伤程度明显减轻， MDA含量明显降低 (P0．01)，SOD和 GSH活性明显升高 (P0．01)，TNF一0l和 IL一6水平显著降低 (P 0．01)，HMGB1的表达与释放受抑制 (P0．01，P0．05)。结论 HDN对 CC1所致小鼠急性肝损伤具有保护作 用，其机制可能与抑制脂质过氧化，减少TNF—d及 IL一6的产生以及抑制HMGB1的表达和释放有关。 【关键词】 橙皮苷；急性肝损伤；肿瘤坏死因子一 ；白细胞介素一6；高迁移率族蛋白B1 病毒性肝炎、药物性肝损害、自身免疫性肝炎、肝 周龄，体重 l8～22g；HDN(临用前用0．5％羧甲基纤维 硬化及肝癌等肝病已成为世界范围内危害人群健康的 素钠配成悬浊液)(Sigma公司)；CC1(临用前溶于橄 主要疾病之一。橙皮苷 (hesperidin，HDN)是橙皮素与 榄油)(北京化学试剂公司)；谷丙转氨酶 (ALT)和谷 芸香糖形成的糖苷，为二氢黄酮衍生物 ，具有抗脂质过 草转氨酶 (AST)试剂盒 (四川迈克生物科技股份有限 氧化及清除氧 自由基、抗炎和免疫调节作用 。目 公司)；丙二醛 (MDA)、超氧化物歧化酶 (SOD)、谷胱 前国内外相关研 究证 实，HDN可 以保护 四氯化碳 甘肽 (GSH)和考马斯亮蓝蛋白测定试剂盒 (南京建成 (CC1)所致的急性肝损伤，机制主要包括：清除氧 自由 生物工程研究所)；TNF一 和 IL一6试剂盒 (欣博盛生 基、稳定细胞膜结构，抑制脂质过氧化反应 ，但关于 物技术有限公司)；HMGB1试剂盒 (伊莱瑞特生物科技 细胞因子和炎症介质在 HDN对急性肝损伤保护当中 有限公司)；TRIzol试剂 (Invitrogen公 司)；总 RNA提 的作用报道少见。2012年 10月至2013年 12月，本实 取试剂盒 (天根生化科技有限公司)；RT～PCR试剂盒 验用 CC1诱导 ，建立急性化学性肝损伤模型，在既往 (宝生物工程有限公司)；HMGB1的PCR引物 (上海生 研究基础上，进一步观察HDN对炎性细胞因子肿瘤坏 工生物工程技术服务公司)。 死因子 一 (TNF一0)【和 白细胞介素一6(IL一6)以及 1．2 动物分组与干预 30只小鼠适应性喂养 1周后， 炎症介质高迁移率族蛋 白B1(highmobilitygrouppro— 参照文献