沉默GST-π基因表达对EC9706／cDDP细胞顺铂耐药性的影响.pdfVIP

· d · 郑州大学学报 (医学版) 2014年 1月 第 49卷 第 1期 doi：10．3969／j．issn．1671—6825．2014．O1．002 沉默 GST．1r『基 因表达对 EC9706／cDDP细胞顺铂 耐药性的 影响 唐 悦，轩小燕，柳璐璐，李 敏 郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室 郑州 450001 #通讯作者 ，女，1975年 1月生 ，博士，副教授 ，研究方 向：食管癌防治，E—mail：liminzzu@gmail．corn 关键词 EC9706／eDDP细胞 ；耐药 ；谷胱甘肽 S转移酶一耵；RNA干扰 中图分类号 R735．1 摘要 目的：观察沉默谷胱甘肽 s转移酶一订(GST一1T)基 因的表达对食管鳞状细胞癌顺铂耐药细胞系 EC9706／ cDDP细胞耐药性 的影响 。方法：构建靶向GST一 基 因的 siRNA重组慢病毒 GSTsil、GSTsi2和无义对照 GSTsiC，转 染 EC9706／cDDP细胞 。通过 RT—PCR及 Westernblot法检测 GSTsil、GSTsi2和 GSTsiC感染前后 EC9706／cDDP细 胞 中GST一1TmRNA和蛋 白的表达 ；MTT法检测感染 GSTsi2、GSTsiC与未感染的EC9706／cDDP细胞对顺铂敏感性的 变化。结果：感染 GSTsil、GSTsi2后 EC9706／cDDP细胞 GST一耵mRNA的表达下调 (F=3．490，P0．001)，其蛋 白表 达也减弱 。感染 GSTsi2的EC9706／cDDP细胞对顺铂 的耐药指数较感染 GSTsiC和未感染的EC9706／cDDP细胞降 低 (F=50．510，P0．001)。结论 ：沉默 GST一 基 因的表达可降低 EC9706／cDDP细胞的顺铂耐药性 。 EffectofGST一，rrexpressionandmechanismsofreversingdrug—resistantto EC9706／cDDP ofesophagealcancercells TANG Yue，XUAN Xiaoyan，LIULulu，LIMin DepartmentofMicrobiologyandImmunology，ZhengzhouUniversity，Zhengzhou450001 Keywords EC9706／cDDP cell；drug—resistant；glutathioneS-transferase一耵 ；RNA interfering Abstract Aim ：ToobservetheeffectsofsilencingtheexpressionofGST一可O11thedrug—resistanceofesophagealear— einomacells．Methods：ThelentivirusofsiRNA targetingtoGST．1Twasconstructed．EC9706／cDDPcellswereinfeeted bythelentivirusnamed GSTsil．GSTsi2．ThemRNA andprotein expressionsofGST一竹 beforeandafterinfection were measuredbyRT—PCR andW esternblot．Cellsweredividedintofourgroups：cellsinfectedwithGSTsi2，GSTsiC，untreat- edEC9706／eDDP andEC9706．DrugsensitivitytocDDPwasdeterminedbyMTT．Results：TheexpressionlevelofGST- mRNA incellsinfectedbyGSTsilandGSTsi2werelowerthanthoseincontrolcells(F=3．490，P0．001)，andtheex— pression ofGST-iTproteinwasalso decreased．Comparedwith untreatedEC9706／cDDP andEC9706／cDDP infectedby GSTsiC，th