沉默Nek2基因对卵巢癌SKOV3细胞周期的影响.pdfVIP

重庆 医学2015年 4月第44卷第 11期 1463 论著 ·基础研究 doi：10．3969／j．issn．1671—8348．2015．11．007 沉默 Nek2基 因对卵巢癌 SKOV3细胞周期 的影响 范婷婷 ，唐 良萏。△ (：．重庆市合川区人 民医院妇科 ，重庆合川 40l520；2．重庆医科大学附属第一医院妇产科 ，重庆 400016) [摘 要] 目的 研究RNA千扰NIMA相关激酶 2(Nek2)表达对卵巢癌细胞 SKOV3细胞周期的影响及其相关的分子机 制 。方法 将针对 Nek2基因的 siRNA转染至SKOV3细胞 中，采用流式细胞技术检测SKOV3细胞周期变化 ，并用Westernblot 技术检测 Nek2一siRNA 转染入卵巢癌 SK0V3细胞 48h后 ，与细胞周期相关的因子 cyclinB1、CDK1及 P27蛋 白表达水平 以及 ERK1，／2磷酸化 水平的变化 。结 果 空 白对 照组 、阴性对 照组 和 RNA 干 扰 组 中处 于 Gz／M 期 的细 胞 比例 分 别 为 13．72 、 12．27／00和 1．56 ，与两对照组 比较 ，处于 G2／M 期的干扰组细胞 明显减少(P0．05)。Nek2基 因沉默后 ，与两对照组 比较 ，SK— oV3细胞 内 cyclinB1和 CDK1的蛋 白表达水平 明显 下降 ，P27的蛋 白表达 水平 明显上调 ，SK0V3细胞 内 ERK1／2磷 酸化水平明 显下降(P0．05)。结论 沉默 Nek2基 因，可阻止卵巢癌 sK0V3细胞启动有丝分裂，从而抑制其增殖 。 [关键词] RNA干扰 ；卵巢肿瘤；细胞周期 ；NIMA相关激酶 [中图分类号] R737．31 [文献标识码] A [文章编号] 167l-8348(2015)111463—03 EffectofsilencingNek2geneon cellcycleofovarian cancerSKOV3 cells FanTingting ．TangLiangdan。 (1．DepartmentofGynecology，HechuanDistrictPeoplesHospital，Chongqing401520，China；2．Department0l，Gynecology andObstetrics，FirstAffilliatedHospitalofChongqingMedicalUniversity，Chongqing400016，China) [Abstract] 0bjective TostudytheeffectofsilencingNek2viaRNAioncellcycleofovariancancerSKOV3cellsandthere— latedmolecularmechanism．Methods TheNek2一siRNA wastransfectedintotheovariancancerSKOV3cells．Thechangeofcellcy— cleofSKOV3cellsat48haftertransfectionwasexaminedbytheflow eytometrytechnique；Westernblotassaywasusedtodeter— minetnechangeoflevelofthecellcyclerelatedfactorscyclinB1，CDK1，P27andthephosphorylationleveloftheERK1／2after Nek2一siRNA transfectionfor48h．Results Theflow cytometrydetectionresultsshowedthattheproportionofthecellsinG2／M stageintheblankcontrolgroup，negativecontrolgroupandRNAigroupwas13．72 ，12．27 and 1．56 respectivel