沉默热休克蛋白70基因对 A549细胞凋亡的影响.pdfVIP

JournalofZhengzhouUniversity(MedicalSciences) Sep． 2015 Vo1．50 No．5 · 64l · doi：10．13705／j．issn．1671—6825．2015．05．013 沉默热休克蛋 白70基因对 A549细胞凋亡的影响：I： 阙菡雅¨，王小龙 ，李 杰 ，徐小艳¨，夏艳秋 闱 舫 1)郑州大学公共卫生学 院劳动卫生学教研室 郑州 450001 2)靖边县疾病预防控制 中心慢性病科 靖边 718500 3)河南省职业病防治研 究院毒理科 郑州 450052 #通信作者 ，女 ，1974年7月生 ，博士 ，教授 ，研究方 向：职业肿瘤和应激 医学 ，E-mail：zhoufang23@sina．COB 关键词 肺癌；A549细胞；siRNA；热休克蛋 白70；JNK；凋亡 中图分类号 R730．1 摘要 目的：探讨沉默热休克蛋 白70(HSP70)的表达对人肺腺癌 A549细胞凋亡的影响。方法 ：将体外培养 的 A549细胞分为空 白对照组 (仅加入转染试剂 Lipofectamine2000)、阴性对照组 (转染无关序列)和干扰组 (转染 HSP70siRNA)3组，采用流式细胞仪检测 A549细胞凋亡率 的变化 ，采用实时定量 PCR法检测各组细胞 中HSP70 mRNA表达 的差异 ，采用 Westernblot检测各组细胞 中 HSP70、p-JNK及 Caspase一3蛋 白表达 的变化。结果 ：转染 后 24h，干扰组 A549细胞 中HSP70mRNA及蛋 白表达明显受到抑制 ，与空 白对照组和 阴性对照组相 比差异有统计 学意义 (F：150．348和 450．953，P均 0．001)；转染 48h后 ，干扰组细胞凋亡率高于空 白对照组和阴性对照组，差 异有统计学意义 (F=229．636，P0．001)。与空 白对 照组和 阴性对照组相 比，干扰组 A549细胞 中p-JNK蛋 白和 Caspase一3蛋 白表达 明显受到抑制 ，差异有统计学意义 (F=877．094和 340．808，P均 0．001)。结论 ：沉默 HSP70 的表达可促进 A549细胞 的凋亡 ，且该过程伴随着 p-JNK和 Caspase一3表达水平 的降低 。 EffectofsilencingHSP70geneonapoptosisofA549 cells QUEHanya”，WANGXiaolong ，LIJie ，XUXiaoyan¨，XIAYanqiu¨，ZHOUFang J)DepartmentofOccupationalHealth，CollegeofPublicHealth，ZhengzhouUniversity，Zhengzhou450001 2)ChronicDiseasesOffice，JingbianCenterforDiseasePreventionandControl，Jingbian718500 3)Toxi— cologyOffice，HenanInstituteofOccupationalMedicine，Zhengzhou450052 Keywords lungcancer；A549cell；siRNA ；heatshockprotein70；JNK；apoptosis Abstract Aim：Toexploretheeffectofheatshockprotein70(HSP70)bysmallinterferingRNA (siRNA)onthe 河南省教育厅科学技术研究重点基金资助项 目 12B330008 [5]冯涛 ，王懿春 ，郭 曲练．TGFI31对人胚肺成纤维细胞 中 waycooperation inTGF。beta—induced epithelial—mesenchy— miR一29表达 的影响 [J]．医学临床研究，2014，3l(4)： realtransition[J]．CurtOpinCellBiol，2014，31：56 631 [10]梁艳 ，王皓，杨再兴，等 ．上皮问质转化在纤维化疾病 中 [6]KingTE Jr，