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细胞色素P450酶系循环催化的新途径
中 国 生 物 工 程 杂 志
第 22 卷第 5 期 JOURNAL OF CHINESE BIOTECHNOLOGY 2002 年 10 月
细胞色素 P450 酶系循环催化的新途径
冷欣夫 邱星辉 伍一军
( 中国科学院动物研究所 虫鼠害综合治理国家重点实验室 北京 100080)
摘要 细胞色素 P450 酶系的循环催化反应需要 电子供体 NADPH 或 NADH 等辅助因子系
统 ,因此它在实际应用中受到制约 。用电极电解或锌粉作电子供体取代 NADPH 辅助因子可
以获得与NADPH 相似的底物转换率 。此外 ,还讨论了 P450 的“定向进化”产生的突变体在
无NADPH 等辅助因子存在下 ,通过“过氧化物途径”使底物羟基化 。
关键词 细胞色素 P450 电子供体 辅助因子 定向进化 介导体
( )
已知细胞色素 P450 在循环催化不同类型化 供体所得到结果具可比性 表 1 。
合物的代谢和解毒中起重要作用 ,如对生物体内 表 1 P450 融合蛋白电解或 NADPH
源化合物前列腺素和类固醇的生物合成和对外 催化代谢速率的比较
( ) (
源化合物如药物 包括农药 及环境污染物 如
代谢速率
PCBs ,PAH) 的降解等 。P450 酶催化氧化还原反 融合蛋白和底物 反应类型 (nmolminnmol P450)
应中 , 需要从氧分子中引入 1 个氧原子插入底
电解法 NADPH
物 ,另一个氧原子形成水 。反应中还需要电子供 rF450 [mBov17AmRatOR ]LI
( ) 黄体酮 17羟基化作用 20 28
体 NADPH 或NADH 和电子传递蛋白,如微粒体
黄素蛋白、NADPHP450 还原酶或线粒体的铁硫 孕[ 甾]烯醇酮 17羟基化作用 50 50
( )
蛋白 皮质氧还蛋白 。P450 酶系应用于环境污
rF450 [mRat 4A1mRatOR ]LI
染物的处理或精细化合物的合成 ,最主要的障碍 ω
月桂酸 羟基化作用 20 50
( ) (
是 : 1 反应中需要昂贵的辅助因子 如 NADPH
rF450 [mHum 3A4mRatOR ]LI
) ( )
或NADH , 2 此辅助因子在无底物存在时可钝 β
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