对类风湿因子具有高反应活性的热聚IgG的制备①.pdf

， (¨ 145 ．、、— ， 对类风湿因子具有高反应活性的热聚IgG的制备① ，f刃2一 世壹运堕墨俞耀庭吕宪禹(南开大学分子生物所生物活性材料开放实验室，天津3o0町1) 中国圈书分类号 R，92．1 摘 要 目的：优化热聚 IgG的镧备条件．提高对 RF的检测灵敏度。方法 ：利用高效液相凝肢色谱和酶联免疫吸附技术 研究加热条件对热聚 IgG分子量分布及其对类风温因子结台能力的影响。结果：将 IgG溶液(10 )在 旺℃热聚30 n，其 优势聚台度为 11左右 ，此时它对类风湿因子的结台能力最强。结论：应用高效液相凝胶色谱与 ELISA技术．对热聚 I 体系 巨L上^铡务 reactivityt0rheumatoidfactors FU E ，CttEN Chang-Zhi，YU Yao- a／ oratory NankalUnv／ers／ty，孔鹕 300071 Ab岛喇 ObJe~iv~：To。pⅢizethe 印a|a6o．1conditions。fheat-ag唰 edIgGh increasm8thede~enninmion d嘶 0fRFs． M蒯 凼：l t0fheming~ fions咖 molecularw嘞 血 姐 。fl州 -ag e【dIgG(HAlgG)and tytorl~tmmSod to (RFs)waBstudiedby }眦 andELISA．髑p 州y．P,,z~mlls：The删 咿0f} f0RFs惴 corrc~vef0size0f the 叩曲 oor栅 o．1wast0beetIgG吕0Iutjon(10 )吐62℃ 30udnCesxduflan~Theautho~H1日 theMw de“锄 删6o．1and枷 lv 皿咖 iBforl叫 ．蹦reg帅，dI systemby呷 HPLcendELISA．the耐 0d0fde wasde 瑚edandthe吕e憎 lyendm~cura- cywm improved． words H~-agSresmedIgG Rhemmm~ fectors GeI-HPI,C ELISA 热聚IgG是在一定温度条件下由lgG自身聚合 SephadexG,-200柱从 7球蛋白中提纯 l 。 而成 的多聚体 ，它具有 同类风湿因子 (Rheumatoid 1．2．2 热聚IgG的制备 将 IgG溶液 (10mg／n~)置 ， RF)反应的特性 ，常用于血清中 RF的检 一 定温度的恒温水浴中保温一定时间，球水冷却。 测。 ；G的热聚条件直接影响产物的结构及其生物 1．2．3 聚合度 的测定 利用校正 的TSK04000 反应活性。本文旨在利用高效液相凝胶色谱和酶联 HPLC色谱柱测定聚合物的分子量，计算聚合度。 免疫吸附技术研究热聚条件对产物分子量分布及其 1．2．4 对 RF结合能力的测定 取热聚 IgG溶液(2 对 RF结合能力 的影响，优化制备条件，提高对 RF n 1】1)O．2l1】l，加入0．3l1】l类风湿血清和0．2l1】l生 检测的灵敏度。 理盐水 ．混匀，室温反应 1h后转入4qc冰箱过夜。 用E璐 A试剂盒测定反应前后体系中3种 RF的浓 1 材料与方法 度，计算 RF被结合的量。 1．1 材料 球蛋 白注射液由中国医学科学 院血 2