神经母细胞瘤细胞Boyden小室体外侵袭模型建立及CXCL12及其受体拮抗剂AMD3100对神经母细胞瘤迁移和侵袭能力影响.pdfVIP

神经母细胞瘤细胞Boyden小室体外侵袭模型建立及CXCL12及其受体拮抗剂AMD3100对神经母细胞瘤迁移和侵袭能力影响.pdf

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第一部分 中文摘要 第一部分 神经母细胞瘤细胞Boyden小室体外侵袭模型的建立 硕士研究生王莉(小儿外科) 指导老师 董蓓教授 中文摘要 目的神经母细胞瘤是儿章常见的恶性肿瘤之一,侵袭程度高,为了研究神 经母细胞瘤的侵袭特性,本实验室建立了神经母细胞瘤的原发瘤细胞系及神经 母细胞瘤患者骨髓转移灶细胞系,为研究神经母细胞瘤的生物学特性提供一个 良好模型。Boyden小室细胞培养模型具有综合判断肿瘤侵袭和转移的能力,侵 袭小室呈桶状,底部装有聚碳酸醋微孔滤膜,滤膜表面涂有人工基底膜,侵袭 小室和培养板共同构成细胞侵袭的上、下室。待测细胞种于上室,下室则是吸 引细胞向下迁移的趋化液。有侵袭力的细胞首先粘附于人工基底膜表面,进而 分泌基质金属蛋白酶消化降解人工基底膜,并通过迁移运动而穿过多孔滤膜, 最后附着在滤膜另一面,穿过滤膜的细胞数目可反映该细胞的侵袭力。为了探 讨Boyden小室法应用于神经母细胞瘤细胞的具体条件,我们检测了四种不同的 神经母细胞瘤细胞系在不同细胞浓度和不同时间的侵袭细胞数,从中获得稳定 的细胞浓度和侵袭时间,作为神经母细胞瘤体外侵袭性模型的标准化条件。 经母细胞瘤细胞系置入Boyden小室侵袭模型上室,分别培养24、36、48、60h, 观察不同浓度的细胞在不同时间穿透基质胶聚碳酸酯膜的细胞数,用Boyden 小室测定四种神经母细胞瘤细胞系细胞侵袭的能力。 结果Boyden小室侵袭模型显示四种不同细胞系的侵袭能力不完全相同, 在第24h透过ECM胶聚碳酸酯膜的细胞较少,随时问的延长而增多,在48h 前后增幅最明显;同时随细胞浓度的增高,透过细胞数也增加,但细胞浓度大 于2.5x105/ml时,透过ECM胶聚碳酸酯膜的细胞数变化不显著;在同一条件 下,有骨髓转移能力的细胞系其侵袭能力大于无骨髓转移能力的细胞系。 结论本实验成功建立了神经母细胞瘤细胞Boyden小室体外侵袭模型,该 模型对体外神经母细胞瘤细胞迁移、侵袭能力的测定和研究及对探明神经母细 第3页 第~部分 中文摘要 胞瘸的转移机制和影响因索具有重要意义。 关键词:神经母细胞瘪细胞系:Boydend,室:侵袭 第4页 第一部分 英文摘要 The and forthe ofinvasive buildingmeaningapplication chamberin vitrototheneuroblastomacells model-Boyden Abstract isoneof themostcommon tumorsof Objective:Neuroblastoma malignant ownsthe invasion.Inorderto the invasionfeatureofthe children,it higll study NB, celllinesofNBourselvestooffera webuildthenew modelforthe

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