钩虫的感染和免疫.docxVIP

钩虫的感染免疫及疫苗研制——读书报告流行病学-地区、发病率寄生于人体的钩虫主要是十二指肠钩虫和美州板口线虫，偶尔会有锡兰钩虫、犬钩虫等。目前全世界钩虫感染人数约有13亿，钩虫病的流行导致每年约55000人死亡[1]。并且钩虫病已经成为一些热带及亚热带发展中国家的主要公共卫生问题。目前我国约有1.94亿人感染钩虫，平均感染率为17.2%[2]。在我国钩虫病主要流行区分布于长江流域及其以南十余省的广大农村地区。北方以十二指肠钩虫为主，南方以美洲钩虫为主，大多地区存在两种钩虫的混合感染。感染主要后果有研究显示，钩虫的感染率与年龄呈正相关，且感染度不随年龄的升高而下降[3-4]。另外钩虫在宿主体内的存活以及钩虫在体内的暴露程度共同决定了宿主的感染程度和临床症状，其中钩虫在宿主体内的存活受宿主自身对钩虫感染的免疫、钩虫的免疫逃逸机制影响。中、重度钩虫感染可使患者出现：（1）缺铁性贫血；（2）营养不良；（3）儿童和新生儿智力发育障碍[5]；（4）严重的消化道出血[6]；（5）妊娠妇女贫血性心脏病及产后感染。钩虫感染的免疫应答有研究结果表明，宿主在感染了钩虫后，钩虫在宿主体内产生的分泌物以及排泄物会作为抗原刺激宿主的免疫系统产生保护性免疫反应。不过这种免疫反应对宿主只有部分的保护作用，并且这种保护性免疫是钩虫特定抗原刺激和多种因素综合作用的结果，是多细胞多信号参与的过程。实验显示保护性免疫表现为：（1）体内虫荷降低；（2）虫体发育迟缓；（3）成虫发育不良；（4）成虫产卵率降低[7]。此外，钩虫入侵宿主并在宿主体内吞食血细胞和肠粘膜细胞时，会注入多种分子，这些分子可以调节宿主的保护性免疫反应，利于钩虫的摄食。钩虫感染具有严格的宿主特异性，因此感染人体的钩虫难以在其他实验动物身上建立感染模型。研究者们发现，犬钩虫和十二指肠钩虫都属于钩口线虫，并且它们的生理学特征和形态结构颇为相似，所以研究人体钩虫时常采用犬-犬钩虫感染模型进行研究。有实验动物证明，在对家犬多次进行犬钩虫幼虫的感染后，家犬可以获得一定的保护免疫，可以抗再次的感染。这一现象也说明钩虫的感染可以获得一定程度的保护性免疫。并且抗再次感染的减虫率达50%-90%。（目前研究钩虫免疫所用的感染性第三期幼虫和成虫的抗原制备均借助于犬钩虫动物模型。）钩虫疫苗钩虫抗原可以分为虫体抗原和ES抗原。虫体抗原是虫卵、钩蚴或成虫浆的提取物；ES抗原是钩虫的幼虫或成虫在体外培养时的排泄物和分泌物。在钩虫的自然感染过程中，宿主免疫反应产生的抗体所识别的靶位多为钩蚴口器和排泄孔排出的ES抗原。一些来自流行区并有一定保护力的感染者的血清也可识别虫体的ES抗原，说明活钩蚴ES抗原可诱发机体产生保护性免疫反应[8]。目前，已从活化钩蚴分泌的ES抗原中鉴定并克隆出3个抗原成分：钩虫分泌抗原1（ASP-1）、ASP-2、金属蛋白酶。ASP-1是钩蚴分泌的ES抗原主要成分。ASP-2是ES抗原中较主要成分，与ASP-1属于同一家族分子[9]。但是两者的生理学功能尚不清楚。可能与抑制宿主免疫反应、钩虫免疫逃避有关[10]。金属蛋白酶含量最少，是一种锌依赖的金属蛋白酶，具有蛋白水解酶活性。它是唯一已经确定了功能的成分[11]。虫体体表抗原也是激发宿主免疫反应的主要靶抗原。经免疫印迹试验证实，犬钩虫第三期幼虫免疫的小鼠血清可识别幼虫主要蛋白抗原成分。Pitchard观察了钩虫感染人群体液免疫应答与抗感染保护力之间的关系，发现血清中IgE抗体滴度与感染者虫荷及粪中虫卵数呈负相关。说明IgE水平与Th-2细胞活化有关[12]。并且总IgE水平以及嗜酸性粒细胞与钩虫的虫体重量及生殖力呈明显的负相关，已知嗜酸性粒细胞的效应主要是参与依赖抗原的细胞介导的细胞毒作用。由此提示寻找与IgE相关的钩虫抗原可能更有希望获得保护性疫苗分子。Behnke在研究锡兰钩虫诱发仓鼠的免疫反应时发现：免疫两次后的仓鼠，再感染时体内的三期幼虫生长缓慢，大部分钩蚴在一周内被清除，小部分钩蚴滞育在第四期幼虫阶段。宿主保护性炎症反应作用于钩虫的三期、四期幼虫，阻止其成熟。但是在人钩虫动物模型未建立前，要取得活的钩虫成虫和第三期幼虫以制备各种抗原较为困难。另外有研究显示，（1）巨噬细胞在γ-干扰素的激活作用下成为杀伤细胞，杀灭部分感染入侵的钩蚴，在抗钩蚴的免疫中起重要作用[13];（2）CD4+T细胞被激活增殖，释放出淋巴因子，刺激B细胞增殖分化，产生IgG等抗体，与嗜酸性粒细胞结合协同发挥细胞毒作用（3）抗体IgG通过细胞上的Fc受体介导细胞毒反应，能识别美洲钩虫成虫分泌的酶类、干预三期幼虫蛋白水解酶的分泌，从而影响幼虫的发育和移行[14]。宿主感染钩虫后普遍伴有特异性抗体水平的升高。但是目前各类抗体在钩虫感染中的具体作用尚待研究。钩虫的免疫逃逸首先我们需要明确免