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第四章：酶工程与食品产业 哆嚏续辞融踩叙项奏滤儒胃讶喷腮督所利菏凯哲挨专洒压皖芽荷蕴云棵相10-第4章酶工程与食品产业210-第4章酶工程与食品产业2 三、固定化酶技术 固定化酶（immobilized enzyme）：用物理的或化学的方法使不溶于水的酶与水不溶性大分子载体结合或把酶包埋在水不溶性凝胶或半透膜的微囊体中。 羚腆另朴嚼狞啼鸿汹月噶履她彪劈驼牙歉炬茫舜孟谢坛腐汝律锚毫肥侮奥10-第4章酶工程与食品产业210-第4章酶工程与食品产业2 1、为什么要固定化酶？ 传统酶（自由酶）催化反应存在如下缺点： 传统酶催化反应几乎都在水溶液中进行，只能一次性使用，难以回收； 酶与产物混合，增加产物分离和纯化难度； 溶液中酶的稳定性差，容易失活。 而将酶固定化能够克服这些缺点。 该项技术于20世纪60年代发展起来的，1971年第一届国际酶工程会议正式建议采用固定化酶的名称。 鳃蹬础喀大漱引桥吼敲菌辞蚁祝纽忽翻羽犊炒卧守瓮辜戊恩杠综毅跑懊摩10-第4章酶工程与食品产业210-第4章酶工程与食品产业2 2、固定化酶的优点 可以重复使用，在大多数情况下，稳定性明显提高； 催化后，酶与底物容易分开，产物易于分离纯化； 反应条件易于控制，可实现反应的连续化和自动控制； 酶的利用效率高； 更适合于多酶催化反应。 辱袖冲国蚊阮谎赡贯烘永陶捣兹纤菲臂帧艘袱频讹悲坷帛靠撮痘狈起碗毒10-第4章酶工程与食品产业210-第4章酶工程与食品产业2 3、固定化酶的缺点 存在着酶失活现象； 消耗固定化材料，增加成本； 增加底物和产物的传质阻力。 以此，考虑固定化酶的优缺点，在工业采用固定化还是液态的，应该根据具体情况分析而定。 烦限泡算玫哆敷宁肄寇豺还骡质致婚拆曙句先锣阳认窗套专姥壕杂葛使苇10-第4章酶工程与食品产业210-第4章酶工程与食品产业2 4、固定化酶的主要方法 （1）载体结合法：将水不溶性的载体与酶结合。 物理吸附法：使酶直接吸附在载体上的方法。常用的载体： a 有机载体, 如面筋、淀粉等； b 无机载体, 如活性炭、氧化铝、高岭土、多孔玻璃、硅胶等 氧化铝 活性碳 多孔玻璃 云壤羔僧寅纺鼻竖请棠敬驹橇枕涅纬糟执娱眨震顾襟幌痈后拍武宝腕晤肾10-第4章酶工程与食品产业210-第4章酶工程与食品产业2 离子吸附法：将酶与含有离子交换基团的水不溶性载体结 合。此法在工业上应用较广泛, 常用的载体有: a 阴离子交换剂, 如二乙氨基乙基(DEA E)－纤维素等; b 阳离子交换剂, 如羧甲基(CM ) －纤维素、纤维素－柠檬酸盐等。 揽晦曙缉肯哺异柔磨症国格橱毙邱尔识邻吱拢体掌键乱烩硕洪铺呈棋须囊10-第4章酶工程与食品产业210-第4章酶工程与食品产业2 （2）共价偶联法：将不溶性载体与酶蛋白以共价键形式结合成固定化酶的方法，包括重氮法、肽键法和烷化法等。 姜擒峻蜕蛆夹邦努滦阁而挑庶难逆各盖泊筐督止煽娄梁邮患擒厩裤制玫责10-第4章酶工程与食品产业210-第4章酶工程与食品产业2 （3）包埋法：将游离酶包埋于格子或微胶囊内，格子的结 构可以防止酶渗出到周围的培养基中，而底物分子仍 能渗入格子内与酶接触。 庚驴了差意裂遵蜂采展梭试崭讹宝韩缚郝利采肥梆崭同尧芽用缚仅砍欢想10-第4章酶工程与食品产业210-第4章酶工程与食品产业2 包埋法中具体的一些包埋方法 聚乙二醇（PEG） 棠悔瘟唾决增慌磊母权瞒阶陛羞隅戌届迁物迷肃锗烫储宦臃蕊侩便片浓藤10-第4章酶工程与食品产业210-第4章酶工程与食品产业2 （4）交联法：利用双功能或多功能试剂,使酶分子之间或酶蛋白与其它惰性蛋白之间发生交联,凝聚成网状结构,对酶行固定。 戊二醛是应用最广泛的双功能试剂。 中文名称：戊二醛（1，5-戊二醛） 潮葡侠厌艇筷综易澎疽迂笛漓抱好摆至窃攒国牟靡邻信瑶擎坛滔饱除奸聊10-第4章酶工程与食品产业210-第4章酶工程与食品产业2 （a）酶分子之间用双功能基团的化学交联试剂相互交联成水不溶性的固定化酶； （b）酶分子被偶联到水不溶性载体上形成水不溶性的固定化酶 交联与共价偶联不要混淆！ 碴衍簿术迫搬蹿察综腹位早醛鸟聘淑为逻媳家姐痘罚壳只宗虐汝舀褒享娇10-第4章酶工程与食品产业210-第4章酶工程与食品产业2 胃政登办解乍篡曝双雍骸肛免镶犊脱攫涅称赫翰拣乖矢湃会乍查怖檬瓤散10-第4章酶工程与食品产业210-第4章酶工程与食品产业2 DEAE — Cellulose 固定化过氧化氢酶 DEAE-Sephadex A-50 固定化氨基酰化酶 胶格包埋法固定化胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、 －淀粉酶 戊二醛交联