超氧化物歧化酶sod的分离纯化实验报告.docVIP

超氧化物歧化酶SOD的分离纯化技术 证明SOD提取过程工艺不同浓度的硫酸铵对纯化SOD蛋白酶的效果 的综合影响 一、摘要： 通过对绿豆的研磨破碎获得SOD粗酶，经过(NH4)2SO4分级分离、透析除盐和浓缩等过程，除去粗酶中的杂质及干扰蛋白。 二、关键词： SOD 连苯三酚自氧化法 SOD酶活性测量 透析除盐 三、前言： 超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase），简称SOD，是一种新型酶制剂，属金属酶.它是一种源于生命体的活性物质，SOD是机体内危害最大的氧自由基专一清除剂，亦是其他自由基最有效的清除剂，它与体内的谷胱甘肽过氧酶、过氧化氢酶联手，把自由基转化为水和氧分子。能消除生物体在新陈代谢过程中产生的有害物质。对人体不断地补充 SOD具有抗衰老的特殊效果。本实验以绿豆为原料提取SOD，通过各步的分离提纯，应测得酶总活力逐渐减小，比活逐渐升高.通过本实验掌握物质分离纯化的实验设计过程，以及硫酸铵分离、透析除盐、浓缩和葡聚糖凝胶层析等物质分离技术。 0.041 20μL -0.006 0.008 0.032 0.038 0.026 0.052 0.077 0.051 25μL 0.020 0.053 0.086 0.066 30μL 0.012 0.054 0.094 0.082 28μL 0.012 0.054 0.090 0.078 27μL 0.065 0.105 0.140 0.075 选取这个连苯三酚用量 离心所得上清液 50μL 0.057 0.072 0.083 0.026 45μL 0.075 0.093 0.108 0.033 40μL 0.044 0.064 0.081 0.037 表2 4支各活性 试剂 用量 0 30 60 60差值 连苯三酚 27μL 0.035 0.078 0.121 0.086 操作有失误 27μL 0.010 0.049 0.084 0.074 选取这个连苯三酚用量 40%沉淀 200μL 0.210 0.217 0.223 0.013 100μL 0.083 0.098 0.110 0.027 80μL 0.079 0.094 0.107 0.028 75μL 0.069 0.084 0.097 0.028 60μL 0.070 0.084 0.100 0.030 50μL 0.056 0.073 0.087 0.031 40μL 0.043 0.060 0.076 0.033 30μL 0.029 0.043 0.056 0.027 操作有失误 35μL 0.031 0.052 0.070 0.039 计算活力 取平均值 35μL 0.038 0.056 0.072 0.036 40%上清液 30μL 0.016 0.033 0.048 0.032 25μL 0.020 0.040 0.056 0.036 计算活力 取平均值 25μL 0.020 0.042 0.060 0.040 50%沉淀 30μL 0.053 0.069 0.083 0.030 操作有失误 30μL 0.042 0.060 0.078 0.036 计算活力 取平均值 30μL 0.052 0.072 0.091 0.039 50%上清液 20μL 0.010 0.040 0.067 0.057 60μL 0.022 0.033 0.043 0.021 45μL 0.014 0.030 0.045 0.031 40μL 0.019 0.037 0.054 0.035 0.021 0.036 0.050 0.029 37μL 0.044 0.061 0.077 0.033 35μL 0.009 0.024 0.038 0.029 30μL 0.028 0.048 0.064 0.036 计算活力 取平均值 30μL 0.010 0.028 0.044 0.034 计算结果： 其中，样品总量是150ml，40%上清50ml，40%沉淀定容到51ml，50%上清50ml，50%沉淀定容到51ml。 总活力：加入酶量相当的酶活力单位（unit）=1.12 提取液的总活力（或材料总活力）（unit）=3906.97 40%沉淀：加入酶量相当的酶活力单位（unit）=0.98 提取液的总活力（或材料总活力）（unit）=1409.266 40%上清：加入酶量相当的酶活力单位（unit）=0.97 提取液的总活力（或材料总