色谱联用技术的分析.doc

色谱联用技术的分析 黄月丹 摘要：目的了解色谱联用技术在药学领域应用及发展状况。方法查阅近些年国内外相关资料进行总结综述。 关键词：色谱联用技术 应用 药学领域 发展状况 引言 色谱分离模式多种多样，适用范围广，是解决复杂体系中混合物分离分析的高效手段．但色谱对化合物的定性常常借助于标志物的对照才能进行保留值的定性和定量，因此，色谱和各种光谱手段的联用技术一直是当代分析工作者所追求的目标。在药物样品的分析检测中，试样的预处理一般必不可少，因此，色谱联用技术就问世了。 色谱联用技术 色谱联用技术对混合物的分析具有较高的灵敏度和选择性及广泛的适用性，可对提取物中的已知、未知结构的成分及其代谢物进行定性分析，而质谱联用可进行中药成分及其生物样品的定量分析，使其在中药研究中得以广泛应用，为加快寻找先导化合物提供了一种高效、切实可行的分析方法。我们相信，随着色谱联用设备的普及，必将在药物研究领域得以广泛应用，从而加快我国药物现代化的研究进程【7】。色谱联用技术综合了成分分析的色谱和结构鉴定的光谱手段的优点，使得对化学成分混合物的研究能力大为增强[1]。对于不纯化合物的鉴定可以很容易利用高效色谱分离后进行定性 ，提高鉴定的可靠性。而对于混合物体系则可以充分利用色谱高效分离能力和光谱手段的定性能力进行混合物定性及定量研究[3]，完成以前所不能解决的问题。 1．1 色谱—质谱联用 质谱(mass spectrometry，MS)法的主要特点是能给出化合物的分子量、元素组成、经验式及分子结构信息，具有高灵敏度、高定性专属性及检测快速的优点。因此，与具有高分离能力的色谱联用技术，迅速成为药物研究中不可缺少的方法。常用于药物分析的方法有气相色谱—质谱法(gaschmmatography—mass spectrometry，GC—MS)、液相色谱—质谱法(1iqid chromatography—mass spectrometry，LC—MS)。GC—MS法历经半个多世纪的发展，已成为相当成熟且应用广泛的分离分析技术。它可同时完成待测组分的分离和鉴定，特别适用于多组分混合物中未知组分的定性定量分析、化合物的分子结构辨别、化合物的分子量测定和元素组成分析。近年来随着计算机技术的飞速发展，质谱库检索功能不断完善，GC—MS法对可挥发性未知成分与微量成分的结构分析更是具有独到之处。但是，GC—MS法的应用范围有限，因为所研究的药物样品必须气化，故难以用于极性、热不稳定和大分子化合物的测定。 LC—MS法是以高效液相色谱(HPLC)法为分离手段、MS仪为检测器的一门综合性分析技术，可以弥补传统LC检测器的不足，提高了分析和鉴定复杂混合物的能力。LC—MS法一般采用软电离技术，常用的接口是电喷雾(ESI)、大气压化学源(APCI)等电离源。LC—MS法可用于GC—MS法难以测定的极性、热不稳定的化合物，还可用于离子化、不易挥发的高分子质量化合物。与紫外、二极管阵列等检测法比较，LC—MS法结果更准确、特异性更强、分析范围更广，减少了样品预处理过程，且不需要衍生化步骤。但是，LC是液相分离技术，而MS需要高真空条件，因此联用时的关键是接口技术的研制与发展。1 色谱一质谱联用技术是一项还在发展着的新技术，以上所述只是非常简单的例子，其在中药复方中的应用还有大量的工作有待于深入研究。8色谱与原子光谱联用技术进展色谱与原子光谱联用可以充分利用色谱的高分离性能和原子光谱的高灵敏度和高选择性的优点，实现优势互补，是解决复杂基体中痕量元素形态分析的重要途径．自从1966年KolbCt 等首次阐明了原子吸收光谱法作为GC检测器的潜在能力以来，GC与各种原子光谱分析法的联用技术得到了快速发展．在色谱与原子光谱联用技术中所涉及到的分离技术有气相色谱、液相色谱、超临界流体色谱和毛细 管电泳．这些分离技术各有所长，已经被广泛应用于原子光谱联用技术的研究中．如：气相色谱与原子吸收光谱、原子发射光谱、原子荧光光谱及电感耦合等离子体质谱联用技术目前已有很多报道[3 。q ．另外，高效液相色谱、超临界流体色谱和毛细管电泳与原子光谱联用的技术及其分析应用也有很多报道 。目前，色谱与原子光谱联用技术已经在环境科学和生命科学等领域的研究中得到了广泛的应用．并且，人们预见，它还将在中药现代化、食品安全、商品检验、蛋白质组学、代谢物组学和金属组学的研究领域中发挥重要作用．4 色谱与其它分析手段的联用技术色谱联用技术由于色谱和各种光谱及其它手段的多样性，因而联用方式和技术也多种多样．除了以上介绍的几种联用方式外，还有许多联用方式也已经在实际工作中得到了广泛的应用．如：色谱与热分析仪联用研究化合物的热分解行为[g ；液相和气相色谱联用可以省去烦琐的样品预处理过程，缩短分析时问，并且能够增加鉴