线栓法大鼠脑缺血再灌注模型的制备.doc

线栓法制备大鼠脑缺血再灌注模型的方法研究 马贤德1孙宏伟1 柴纪严1 赵金茹1 （1 辽宁中医药大学，辽宁 沈阳 110032；） 摘要 ① 目的　建立一种比较系统，操作简单，成功率高的大鼠大脑中动脉缺血(MCAO)再灌注动物模型，达到只要读者根据本文所述的方法操作就能制作出MCAO再灌注模型的目的。②方法 成年健康雄性 SD大鼠40只，参照Longa法并适当改进建立MCAO模型20只，假手术组20只。本文将详细叙述手术过程以及再灌注时间点的合理选择。最后利用行为学测试、四氮唑(TTC)染色对模型成功与否进行判定。③ 结论 线栓法是一种操作简单的制备MCAO再灌注动物模型的方法，并且此方法的再灌注效果较为明显。 关键词 动物模型；脑缺血；再灌注 ；线栓法 Establishment a model of rat ischemia-reperfusion injury with intraluminal suture Ma Xian-de1 Sun Hong-wei1 Chai Ji-yan1 Zhao Jin-ru1 (1.Liaoning University of Chinese Traditional Medicine, Shenyang, 110032) Abstract: Objective To establish a model of rat ischemia-reperfusion injury, in terms of the model, the operation will be simple, and the achievement ratio will be high. Methods: 40 Male Sprague-Dawley ( SD ) rats were separated into two groups randomly: 20 were model of rat ischemia-reperfusion injury based on Longa method, and the other 20 were sham-operated group. The process of the operation and the selection of different time point following ischemic-reperfusion were discussed in the paper. What’s more , the model was appraised by behavioral test and Triphenyl Tetrazolium Choloride（TTC） Staining. Conclusion: The operation of intraluminal suture method is very simple for the establishment of model of rat ischemia-reperfusion, what’s more, the effect of reperfusion is very obvious. Key words: Animal Model, ischemia, reperfusion, intraluminal suture 脑缺血动物模型是研究性脑血管病，脑缺血动物模型具有好重复性并能最大程度模拟人类缺血性卒中的发生。1986年，日本学者Koizumi发明了线栓法制备局灶性脑缺血大鼠模型。1995年，我国也出现了相关的报道。 1.4 假手术模型的制备 假手术组手术方式同模型组，但不做栓塞，仅暴露出右侧颈总动脉(CCA)、颈外动脉(ECA)、颈内动脉(ICA)，然后逐层缝合即可。 1.5再灌注的时间及方法 再灌注时间点的选择十分重要，时间过短，神经功能缺失体征不明显；时间过长，脑组织缺血过于严重，失去治疗意义。经过多次试验和文献支撑，我们认为栓塞2小时后进行再灌注不仅神经功能缺失体征明显，TTC染色显示脑组织坏死程度适中，而且如果能进行有效治疗，可以得到满意的治疗效果。再灌注的具体方法是将缝合线打开，完全暴露栓塞线，用眼科镊子固定结扎点，将栓塞线缓慢抽出，直至栓塞线上的0.6cm处标记点暴露出来为止，剪掉栓塞线多余部分，逐层缝合创口。 1.6 神经功能缺失体征评分 参考 Longa及Bederson的5分制法在动物麻醉清醒后24h进行评分。0分：无神经损伤症状；1分：不能完全伸展对侧前爪；2分：向对侧转圈；3分：向对侧倾倒；4分：不能自发行走,意识丧失。分值越高 ,说明动物行为障碍越严重。 1.7 四氮唑红染色 大鼠缺血2h再灌注24h后立即断头取脑,以2%T