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5.酵母核糖核酸分离和组分鉴定
实 验 四
酵母RNA的分离及其组分鉴定 ;实验目的;离心机原理和应用;;核糖核酸(Ribonucleic acid,RNA) ;;实验原理;RNA组份鉴定;实验仪器;试剂和材料;操作步骤; 3、将上清液缓缓倾入30mL酸性乙醇溶液中。注意要一边搅拌一边缓缓倾入。待核糖核酸沉淀完全后,离心(4000rpm)5分
钟。弃去上清液。 ;(二)组分鉴定;2. 嘌呤碱:取一只试管,加入1ml水解液,加入过量的浓氨水(用胶头吸管吸2管约2ml),再加入1 ml 0.1 mol/L硝酸银,观察有无白色嘌呤碱的银化合物沉淀生成。;3. 核糖:取一只试管,加入水解液1ml,三氯化铁浓盐酸溶液2ml,加入苔黑酚乙醇溶液0.2ml,放入沸水浴中5min。注意溶液是否变墨绿色。;4. 磷酸:取一只试管,加入水解液1ml和定磷试剂1ml,在沸水浴中加热。观察溶液是否变成蓝色。;1. 稀碱法提取的RNA为变性RNA,可用于RNA组分鉴定及单核苷酸制备,不能作为RNA生物活性实验材料。
2. 苔黑酚反应特异性较差,凡戊糖均有此反应。因此地衣酚实验不能作为RNA与DNA鉴别的依据。 。
3. 试剂瓶中溶液用胶头滴管取用,吸1管约为1毫升,0.2ml用胶头滴管取4滴即可(每滴约为0.05毫升),
4. 离心:两组配平
5.请将试剂瓶放在原处取用,以免其他同学不能找到。;;下次实验:
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