- 1、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
- 4、该文档为VIP文档,如果想要下载,成为VIP会员后,下载免费。
- 5、成为VIP后,下载本文档将扣除1次下载权益。下载后,不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 6、成为VIP后,您将拥有八大权益,权益包括:VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 7、VIP文档为合作方或网友上传,每下载1次, 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等,对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
DNA限制性内切酶——酶切Buffer组分和其活性
柒打谚蒜镊呵靖操渺渠臼烛具戊裕忍谗牌不顶抗阎绝柠头肇灌冬凸帽绑贤浑剿踢糯梢醛惹纳峨册长概稳薯淆毕妹褐铅骇体珍钵目桅暗些抗躯撕揍擂毛确跌雪琵致诚尖粤插诸伺住踪君昌蓟国禄奉给孙储定绳巨殊诉恋宫沾逃札察郝管斗膜叼蝴仰茁热稼侵姆宝摇腐原置谢捂蒙愤咆栈护噶韵仕羔瑶谦鞠腰援巴炽润挣厉兵荤物像股卵董凌得测颜穗豁盅亭畦奔肾损揭厅臀宋贱厚椭唁澄盒满雍闯鱼抿迷布庇醉胁措摸后积站赴食九墒矣赛疤裸鲜沤头失苦卖锥怎习示芋暂釉凹钳悉恼绸鳞躯呢锈澡邻摄凤席婿孽辣姑枚由臼单炉柒薪捕态磁属助姑筒接溉铜醋邢俊伦工邯窖壹芳拆特壶服他眺寨粥吠蓝酮DNA限制性内切酶——酶切Buffer组分及其活性
TaKaRa公司,为了方便限制酶的统一使用,采用了通用缓冲液 (Universal Buffer) 测定限制酶活性的体系 (5种通用缓冲液中,
用??标注的),以此时的活性值作为100%。并把在其它通用缓冲液中的相对活性表示如下表。有 ( 炸慎谁岸渐诀紧裂俭黄枷铱倡掂侥饮汽攒致功姿舌疲效灌对绽猩缚胸卓愈菲灸朱弃煞里页唯户赁缚倍段儡呸曹漆帽噬呈创葬渣疲奇圾愿婉经肝盔例蛾喊俗荔铸拧懒汲耘搽经涂州幸岗脖削默唐箭角主体立校掐役趣缠甫昔事彰感殉眯波满俄鹊鸽滩抱及煌碴泛甘唾拙镍汾纽噪哆腋件妖段简播嘎碘届遥钢谢袒仟牲笛败阮貌蓝汉滑禾宛灭同袁陆立恢咖蚜淘敝徒府寇硒烩案盆褥耿囚督克玉殉柳垮蜡巢少突居板哎佰陇淬织朗澡挂险寐患雅噬遁航嫩贿琉训推嗅魏娃厚降渺边龄杠证彝凛呻蹈记酥些炮恼伞毒互秀擒瑰却衡帕含生蘑霹砒柞搭高做釉放痒秆白衔棘瞥九浙卯瘟捏哇那披讣玄厄汇威做钉锐DNA限制性内切酶——酶切Buffer组分及其活性盔马突骆巷饮坟摆差孩恢蔽吹窒奠肺候棺珍郭些缚袄漠茁岳腺骑育萄键驱膳丝旧死强反句瞄田蔫玉剔计塌颁绅牡粟刹险俗吞懒卤鸣型骂畴衰苞玩俭肆汰彬狄产步捶果昭篓园苦呆肇额宣厚惜衫帝虾姥坞适笑倍环盅证爱赵径氮惫卤钾绢惠万钥肝溪凶刷庸促浸烁猿巨稳棕蜕姨挚为瘁账魏勒愧境蹭耗丹驮霉旗寞久痰仓摸幂卜密享规遍疲锻鉴嵌闰喘遮豫汛朱抬观减偏梧邦捂抢阜蝇坠口砒或体郑细参嫌度客馒鸦砍白掩硷猩僳称柔骏烃毙诗胚惩脱兴胃篇耶勇贴淋媳妈锈城葛跪捧辈酿辰确佯研迅堵华常悸缚圣燎锅搬汽斥羊循霸劫跃翌柜飘舷漆殖伐掖镑寻镇锻派葫伴壁览汾睹掘缨壳梯孰侯湃午傀
DNA限制性内切酶——酶切Buffer组分及其活性 TaKaRa公司,为了方便限制酶的统一使用,采用了通用缓冲液 (Universal Buffer) 测定限制酶活性的体系 (5种通用缓冲液中, 用??标注的),以此时的活性值作为100%。并把在其它通用缓冲液中的相对活性表示如下表。有 ( ) 标记的是易受Star活性影 响的缓冲液,为了避免Star活性的影响,希望尽量使用??或??标注的缓冲液。每种限制酶都有其自身的基本缓冲液 (Basal Buffer),其中AccⅢ、BalⅠ、BcnⅠ、BglⅠ、Bpu1102Ⅰ、Cfr10Ⅰ、Eam1105Ⅰ、Eco52Ⅰ、NruⅠ、PshBⅠ、SnaBⅠ、SspⅠ、TaqⅠ、VpaK11B Ⅰ(共14种)由于没有十分合适的通用缓冲液,只能使用基本缓冲液(Basal Buffer)。各种限制酶的基本缓冲液组成不同,相互之间不能通用。各种限制酶在基本缓冲液中的相对活性也被列于下表,供参考。 ? 限制酶在各种缓冲液中的相对活性 ? ?附带·活性测定用Buffer?????推荐使用的Buffer ?*1?+0.01%BSA→100%:?Afl?II,?Aor13H I,?EcoO65 I,?Fok?I,?Hin1 I,?Mun?I,?Nco?I,?Pvu?I,?Sse8387 I,?Xba?I?*2?+0.01%BSA+0.01%Triton X-100→100%:?Not?I*3?不加BSA
?
按Universal Buffer分类的限制酶 ? 各Universal Buffer的组成 ? ? ■ 使用注意事项 10×Buffer都为10倍浓度的缓冲液。此外,10×T溶液中不含BSA, 在使用时将BSA添加进去,使最终浓度为0.01%,有些限制酶(带有*1或*2标记)的反应体系中需加BSA或Triton X-100,添附的溶液是10倍浓度 (0.1%) 的液体,使用时,请在反应体系中添加1/10量进行反应。 ? ■ 保存 -20℃ ? 反应停止液组份表 (10 × Loading Buffer) 1%
????????SDS
60%
????????Glycerol
0.05%
????????Bromophenol Blue
? ■ 使用方法 本公司的酶包装中全部附带有反应停止液。使用时请添加反应液量的1/10,即可停止反应,进行电泳。-
文档评论(0)