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核小体转录延长中的核小体移位转录方向四真核生物的转录终止和加尾修饰同时进行真核生物的转录终止是和转录后修饰密切相关的真核生物有聚腺苷酸尾巴结构是转录后才加进去的核酸酶转录终止的修饰点加尾转录终止和转录后修饰密切相关在读码框架的下游常有一组共同序列再下游还有相当多的序列这些序列称为转录终止的修饰点转录不是在的位置上终止而是越过转录终止的修饰点数百个乃至上千个核苷酸后才停顿真核生物的加工与降解第四节真核生物转录生成的分子是初级转录物几乎所有的初级转录物都要经过加工才能成为具有功能的成熟的加工主要在细
RNA-Pol RNA-Pol RNA-Pol 核小体 转录延长中的核小体移位 转录方向 四、真核生物的转录终止和加尾修饰同时进行 真核生物的转录终止,是和转录后修饰密切相关的。 真核生物mRNA有聚腺苷酸(poly A)尾巴结构,是转录后才加进去的。 5?------AAUAAA- 5? ------AAUAAA-- 核酸酶 -GUGUGUG RNA-pol AATAAA GTGTGTG 转录终止的修饰点 5? 5? 3? 3? 3?加尾 AAAAAAA······ 3? mRNA 转录终止 —— 和转录后修饰密切相关。 在读码框架的下游,常有一组共同序列AATAAA,再下游还有相当多的GT序列。这些序列称为转录终止的修饰点。 转录不是在poly A的位置上终止,而是越过转录终止的修饰点数百个乃至上千个核苷酸后才停顿。 真核生物RNA的加工与降解 Post-transcriptional Modification and Degradation of Eukaryotic RNA 第四节 真核生物转录生成的RNA分子是初级RNA转录物(primary RNA transcript),几乎所有的初级RNA转录物都要经过加工,才能成为具有功能的成熟的RNA。 加工主要在细胞核中进行。 几种主要的修饰方式: 1. 剪接(splicing) 2. 剪切(cleavage) 3. 修饰(modification) 4. 添加(addition) 5. RNA编辑(RNA editing) 一、真核生物mRNA的转录后加工 首、尾的修饰的类型 5?端形成 帽子结构(m7GpppGp —) 3?端加上多聚腺苷酸尾巴(poly A tail) 真核生物mRNA转录后,需要进行5?-端和3?-端(首、尾部)的修饰以及对hnRNA进行剪接(splicing),才能成为成熟的mRNA,被转运到核糖体,指导蛋白质翻译。 (一)5?-末端加入“帽”结构 大多数真核mRNA的5?-末端有7-甲基鸟嘌呤的帽结构。 这个真核mRNA加工过程的起始步骤由两种酶,加帽酶(capping enzyme)和甲基转移酶(methyltransferase)催化完成。 加帽时间:新生的RNA长度达25-30个核苷酸时 帽子结构 5’,5’-三磷酸 帽结构的生成过程 帽结构的意义: 可以使mRNA免遭核酸酶的攻击; 也能与帽结合蛋白质复合体(cap-binding complex of protein)结合,并参与mRNA和核糖体的结合,启动蛋白质的生物合成。 (二)3’端加上聚腺苷酸尾巴(poly A) 一般真核生物在胞浆内出现的mRNA,其poly A长度为80至250个核苷酸之间。 poly A的有无与长短,是维持mRNA作为翻译模板的活性,以及增加mRNA本身稳定性的因素。 前体mRNA分子的断裂和加多聚腺苷酸尾是多步骤过程。 5?------AAUAAA- 5? ------AAUAAA-- 核酸酶 -GUGUGUG RNA-pol AATAAA GTGTGTG 转录终止的修饰点 5? 5? 3? 3? 3?加尾 AAAAAAA······ 3? mRNA 真核生物转录后加尾修饰 —— 和转录终止密切相关 核酸外切酶 (三)mRNA的剪接 核酸序列分析证明,mRNA来自hnRNA,而hnRNA和DNA模板链可以完全配对 去除初级转录物上的内含子,把外显子连接为成熟RNA的过程称为mRNA剪接(mRNA splicing)。 剪切过程:首先内含子弯曲成套索状结构,称套索RNA(lariat RNA),然后外显子相互靠近并连接。 断裂基因 C A B D 内含子 鸡卵清蛋白基因 hnRNA 首、尾修饰 hnRNA剪接 成熟的mRNA 鸡卵清蛋白基因及其转录、转录后修饰 鸡卵清蛋白成熟mRNA与DNA杂交电镜图 DNA mRNA 4. mRNA的剪接过程 —— 除去hnRNA中的内含子,将外显子连接 剪接的场所——剪接体 ① 内含子都是5‘-GU开始,3’-AG结束的 snRNP-核小核糖蛋白颗粒 UACUACA - AG UG U6 E1 E2 ② ③ UACUACA - AG UG U4 U5 U6 E1外显子 E2外显子 U1 U2 U1、U4、U5 U2 pG-OH (ppG-OH, pppG-OH)作为铺酶 U-OH GpU pGpA 第一次转酯反应 第二次转酯反应 UpA GpU 外显子1 内含子 外显子2 G-OH UpU pGpA 剪接过程的二次转酯反应 (twice transesterification) 四. mRNA的编辑(mRN
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