脯氨酸测定.pptVIP

实验七 干旱和盐度对植物体内游离脯氨酸积累的影响 【实验目的和意义】 生长在干旱和盐度环境中的植物，体内常积累游离的氨基酸，而游离氨基酸积累的量又往往与环境干旱的程度、盐度和植物对干旱和盐度的抵抗力（即抗逆性）有关。因而，测定植物体内游离脯氨酸的含量，在一定程度上可从生理上了解植物受环境水分和盐度胁迫的情况，了解植物对水分和盐分胁迫的耐受性和抵抗能力，在生产上和育种学上有一定的意义。 【实验原理】 磺基水杨酸对脯氨酸有特定反应，当用磺基水杨酸提取植物样品时，脯氨酸便游离于磺基水杨酸溶液中。然后用酸性茚三酮加热处理后，茚三酮与脯氨酸反应，生成稳定的红色化合物，再用甲苯处理，则色素全部转移至甲苯中，色素的深浅即表示脯氨酸含量的高低。在520nm波长下测定吸光度，即可从标准曲线上查出脯氨酸的含量。 【实验材料】 充足供水的小麦幼苗 干旱处理7天的小麦幼苗 经100mmol/L NaCl处理5天的小麦幼苗 经200mmol/L NaCl处理5天的小麦幼苗 【实验器材和试剂】 分光光度计；电子分析天平；离心机；小烧杯；普通试管；移液管；注射器；恒温水浴锅；漏斗；漏斗架；滤纸；剪刀；洗耳球。 2.5﹪酸性茚三酮溶液配制：将1.25g茚三酮溶于30ml冰醋酸和20mL 6mol/L磷酸中，搅拌加热（70℃）溶解，贮于冰箱中。 3％磺基水杨酸配配制：3g磺基水杨酸加蒸馏水溶解