黑曲霉液态发酵产柚苷酶的分离纯化及其性质研究.pdfVIP

现代食品科技 Modern Food Science and Technology 2016, Vol.32, No.7 黑曲霉液态发酵产柚苷酶的分离纯化及其性质研究 1 1 1 2 2 1 王维娜 ，李佥 ，田晶 ，费旭 ，徐龙权 ，廉萌 (1.大连工业大学生物工程学院，辽宁大连 116034)(2.大连工业大学现代教育技术部，辽宁大连 116034) 摘要：本文针对黑曲霉液态发酵所产柚苷酶的分离纯化工艺及其酶学性质进行研究。将黑曲霉液态发酵所产酶液，依次通过 30%~70%硫酸铵盐析、膜透析和 DEAE-Sepharose FF 阴离子交换层析后得到高纯度柚苷酶。经SDS凝胶电泳仅得到一条清晰 条带，分子量约为 65.10 ku。纯化获得的柚苷酶比酶活可达6932.54 U/mg，纯化倍数和酶活回收率分别为 13.82 倍和 13.30%，并且能 有效水解柚皮苷。进一步研究发现，该酶的最适反应 pH 为4.5 ，最适作用温度为50 ℃，在20 ℃ ~50 ℃及 pH 3.0~6.0 范围内有良好 的稳定性。在一定浓度范围内，K+ 2+ + 3+ 、Ca 和Na 对柚苷酶活性有促进作用，而 Fe 、SDS 和 EDTA-Na 对其活性有明显的抑制作用。 2 本研究为深入理解柚苷酶分离纯化过程，明确其酶学性质，进一步探索柚苷酶应用于天然活性产物生物转化过程的相关机制提供了基 础数据，具有非常重要的科学意义和潜在的应用价值。 关键词：黑曲霉；液态发酵；柚苷酶；纯化；酶学性质 文章篇号：1673-9078(2016)07-72-78 DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2016.7.012 Isolation, Purification, and Properties of Naringinase Produced from Aspergillus niger FFCC 848 by Liquid Fermentation 1 1 1 2 2 1 WANG Wei-na , LI Qian , TIAN Jing , FEI Xu , XU Long-quan , LIAN Meng (1.School of Biological Engineering, Dalian Polytechnic University, Dalian 116034, China) (2.Modern Education Technical Department, Dalian Polytechnic University, Dalian 116034, China) Abstract: The isolation, purification, and enzymatic properties of naringinase produced by liquid fermentation with Aspergillus niger FFCC 848 were investigated. The fermentation broth produced from liquid fermentation by A. niger FFCC 848 was purified