水产养殖用复合微生物粉剂中菌种的分子生物学鉴定.pdfVIP

中国兽药杂志２０１７年６月第５１卷第６期　 　 ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｄｒｕｇ ·９ · － ｄｏｉ：１０．１１７５１／ ＩＳＳＮ．１００２ １２８０．２０１７．６．０２ 水产养殖用复合微生物粉剂中菌种的分子生物学鉴定 ∗ 郭婉萍，赵 晶 ，栾春雨，郭 湾，权春善 （大连民族大学生命科学学院，大连民族大学生物技术与资源利用教育部重点实验室，大连 １１６６００） － － － － － ［收稿日期］２０１６ １２ ０７　 ［文献标识码］Ａ　 ［文章编号］１００２ １２８０ （２０１７）０６ ０００９ １０　 ［中图分类号］Ｓ９４２．３；Ｑ９３９ ［摘　 要］　 对两种市售水产养殖用复合微生物粉剂中微生物菌种进行鉴定。 利用平板分离技术对 粉剂中的微生物进行分离纯化，进行了形态学观察、１６ＳｒＤＮＡ和２６ＳｒＤＮＡ序列分析，并构建系统发 育树。 结果表明，两种微生物粉剂中菌群结构存在一定差异，Ｓ１粉剂中鉴定出５株芽孢杆菌和２株 酵母菌，分别为枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌或索诺拉沙漠芽孢杆菌、葡萄牙棒孢酵母和库德里阿 兹威毕赤酵母；Ｓ２粉剂中鉴定出３株芽孢杆菌、１株放线菌、２ 株酵母菌和３株肠球菌，分别为解木 糖赖氨酸芽孢杆菌、环状芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌或索诺拉沙漠芽孢杆菌、芬氏纤维微菌、酿酒酵 母、库德里阿兹威毕赤酵母、鹑鸡肠球菌、屎肠球菌或乳酸肠球菌。 明确水产养殖用复合微生物粉 剂的菌群结构，为同类产品的安全性及有效性评估提供理论基础。 ［关键词］　 水产养殖；复合微生物粉剂；菌群结构；鉴定；１６Ｓ ｒＤＮＡ；２６Ｓ ｒＤＮＡ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｔｒａｉｎｓ Ｉｓｏｌａｔｅｄ ｆｒｏｍ Ｃｏｍｐｏｓｉｔｅ Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ｐｏｗｄｅｒｓ ｆｏｒ Ａｑｕａｃｕｌｔｕｒｅ ∗ － － － ＧＵＯ Ｗａｎ ｐｉｎｇ，ＺＨＡＯＪｉｎｇ ，ＬＵＡＮ Ｃｈｕｎ ｙｕ，ＧＵＯ Ｗａｎ，ＱＵＡＮ Ｃｈｕｎ ｓｈａｎ （Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ，ＤａｌｉａｎＭｉｎｚｕ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｂｉｏｒｅｓｏｕｒｃｅｓ Ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ（ＤａｌｉａｎＭｉｎｚｕ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ）， Ｍｉｎｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ，Ｄａｌｉａｎ １１６６００，Ｃｈｉｎａ） － 　 　 Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ ａｕｔｈｏｒ：ＺＨＡＯＪｉｎｇ，Ｅ ｍａｉｌ：ｚｈａｏｊｉｎｇ＠ｄｌｎｕ．ｅｄｕ．ｃｎ Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎ ｏｒｄｅｒ ｔｏ ｉｄｅｎｔｉｆｙ ｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｓｔｒａｉｎｓ ｉｎ ｔｗｏ ｃｏｍｍｅｒｃｉａｌ ｃｏｍｐｏｓｉｔｅ ｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｐｏｗｄｅｒｓ ｆｏｒ ａｑｕａｃｕｌｔｕｒｅ， ｐｌａｔｅ ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｉｓｏｌａｔｅ ａｎｄ ｐｕｒｉｆｙ ｔｈｅ ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓ， ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ｗａｓ ｏｂｓｅｒｖｅｄ，１６Ｓ ｒＤＮＡ／ ２６Ｓ ｒＤＮＡ ｇｅｎｅ ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ａｎａｌｙｓｉｓｗａｓ ｃｏｎｄｕｃｔｅｄ ａｎｄ ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ ｔｒｅｅｓｗｅｒｅ ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｅｄ． Ｖａｒｉａｔｉｏｎ ｉｎ ｍｉｃｒｏｆｌｏｒａ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｅｘｉｓｔｅｄｂｅｔｗｅｅｎｔｗｏｍｉｃｒｏｂｉａｌｐｏｗｄｅｒｓ． Ｆｉｖｅ Ｂ