高效液相色谱在食品防腐剂检测中的应用.docVIP

高效液相色谱在食品防腐剂检测中的应用 　　摘 要：近些年以来，食品安全问题备受民众关注，特别是食品添加剂问题更是尤为突出，食品添加剂以防腐剂最为常见，如何对防腐剂进行有效的测定就成为研究食品防腐剂的关键，从而达到了研究防腐剂、认识防腐剂的目的。 　　关键词：高效液相色谱 防腐剂 应用 　　中图分类号：TS207 文献标识码：A 文章编号：1674-098X（2017）03（a）-0071-02 　　?墓胖两瘢?食品一直是人类不可或缺并赖以生存的基本物质，人类既要从食品中获取能量，又要从中获得生长和生存所必须的碳水化合物、丰富的蛋白质和脂肪类营养物质。在食品长期的存放过程中，在外界微生物和有害生物的作用下，导致食品腐烂变质。人们在常年的经验和知识的积累中找到了很多防止食物变质的方法，如低温冷藏、干燥、隔绝空气、射线辐射等方法来杀菌和抑菌。在生产生活中，人们更愿意用化学方法来杀菌和抑菌，也就是在食品中添加一定种类和一定计量的防腐剂，随之而来的就产生了食品防腐剂的检测和检定问题。 　　常用的食品防腐剂主要有苯甲酸钠和山梨酸钾两种，其原理是通过未解离分子及盐类转变成相应的酸后起到抗菌的作用，所以，他们在酸度较低的食品中效果最佳，在中性环境的食品中表现的较为欠佳，故称这类防腐剂为酸性防腐剂，它们是目前市面上最常用和常见的防腐剂。山梨酸是一种不饱和脂肪酸，别名又叫B二烯酸，花楸酸，Sorbistat。化学名称：2，4-己二烯酸，分子式：C6H8O2，中文名称：山梨酸、己二烯酸、清凉茶酸、2，4-己二烯酸、2-丙烯基丙烯酸，相对分子量或原子量：112.13，密度：1.204（19 ℃），熔点：132 ℃～135 ℃，沸点：228 ℃（分解），闪点：127 ℃，白色针状或粉末状晶体，有特臭。在乙醇中易溶，在乙醚中溶解，在水中极微溶解。从安全性方面来讲，山梨酸是一种国际公认安全（GRAS）的防腐剂，安全性很高，联合国粮农组织、世界卫生组织、美国FDA都对其安全性给予了肯定，但如果食品中添加的山梨酸超标严重，消费者长期服用，在一定程度上会抑制骨骼生长，危害肾、肝脏的健康。苯甲酸又称安息香酸（carboxybenzene）、苯酸（phenylformic acid）、苯蚁酸、benzoic acid，分子式：C7H6O2，分子量：122.121 4，结构简式：C6H5-COOH（苯环-COOH），鳞片状或针状结晶，具有苯或甲醛的臭味，服用过多会对人体肝脏产生危害，甚至致癌。 　　高效液相色谱是在20世纪60年代末期，从气相色谱和经典液相色谱的基础上发展起来的新型分离、分析技术。它采用了新型高压输液泵、高灵敏检测器及高效微粒固定相，在分离速度、分离效能及检测灵敏度和自动化方面都达到了完美的程度，其方法特点有以下方面。 　　（1）分离效能高由新型高效的填出原料作为固定相，色谱柱的柱效可达每米30 000块理论塔板数。 　　（2）在高效液相色谱中检测灵敏度很高且最为广泛使用的检测器是紫外吸收检测器，其最小的检测量可达10-9 g。 　　（3）分析速度较快高效液相色谱采用了高压泵，输液的压力可达40 MPa，是流动相的流速大大加快，达到1～10 mL/min，做完一个样品的时间大幅减少，仅需几分钟。 　　（4）分析样品范围较广高效液相色谱的分析范围较广，还可以分析相似的旋光异构体。 　　（5）流动相的种类多高效液相色谱可选择的流动相较为广泛并且便于制作。 　　我们用于检测山梨酸钾和苯甲酸钠所用的高效液相色谱仪是由日本岛津公司生产的型号为LC-2010A的一款带自动进样器的液相色谱，其特点是分析高效率，有效性确认自动化，它由脱气单元、低压梯度单元、泵单元、混合器、自动进样器、柱温箱以及UV-VIS检测器构成，使用标准化配置管构成一体化装置，提高了系统的可靠性，它几乎没有装置间的差异，方法转换简便[1]。流量的准确性、梯度浓度的准确性以及几乎不产生交叉污染的进样准确性，使数据可靠性大幅提高。 　　山梨酸钾和苯甲酸钠的检测如下。 　　（1）标准样品的制备各取浓度为10 mg/mL的苯甲酸钠和山梨酸钾标准溶液1 mL定容至100 mL，配成浓度为0.1 mg/mL的标准溶液，混匀并过0.45 mm滤膜。 　　（2）流动相的配制流动相A称取1.54 g乙酸铵溶于1 000 mL容量瓶，经0.45 mm膜过滤。流动相B甲醇（色谱纯）过0.45膜。 　　（3）样品的处理称取4～5 g样品定容至25 mL，固体样品1～2 g粉碎浸泡过夜并摇匀，调pH值至中性，上离心机取上层澄清液体过0.45 mm滤膜，上机备用。 　　（4）高效液相色谱仪的检测条件设定流速：1.0 mL/min，柱温箱温度：40 ℃，流动相配比：流动相A96%、流动相B