化妆品用叔丁基羟基苯甲醚中苯甲醇检测方法.DOCVIP

附件5： 化妆品用叔丁基羟基苯甲醚中苯、甲醇检测方法 1 适用范围 本方法规定了测定化妆品用叔丁基羟基苯甲醚中苯(CAS：71-43-2)、甲醇(CAS：67-56-1)的气相色谱法。本方法化妆品用叔丁基羟基苯甲醚中苯甲醇的测定2 方法提要 样品在顶空瓶中经过加热提取后，用具有氢火焰离子化检测器的气相色谱仪测定其中的苯和甲醇，以保留时间定性，标准加入单点法计算含量。本方法对苯的检出限为2.5μg，定量下限为7.5μg；对甲醇的检出限为10μg，定量下限为30μg。若取5.0g样品测定，本方法对苯的检出浓度为0.00005％，最低定量浓度为0.00015％；本方法甲醇检出浓度为0.0002％，最低定量浓度为0.0006％。3 试剂和材料 除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为一级实验用水。 3.1 N,N-二甲基甲酰胺。 3.2 苯，色谱纯。 3.3 甲醇，色谱纯。 3.4 混合标准储备溶液［（苯）=500μg /mL（）=2000μg /mL］：分别准确称取苯（3.2）0.05g、甲醇（3.3）0.2g（精确至0.1mg），置于100mL容量瓶中，用N,N-二甲基甲酰胺（3.1）定容至刻度，摇匀，配成苯和甲醇的质量浓度分别为500μg /mL、2000μg /mL的标准储备溶液。 3.5 系列浓度标准工作溶液：用N,N-二甲基甲酰胺（3.1）将上述（3.4）混合标准储备溶液分别配成苯浓度为0μg /mL、1.5μg /mL、5μg /mL、10μg /mL、25μg /mL、50μg /mL、100μg /mL，甲醇浓度为0μg /mL、6μg /mL、20μg /mL、40μg /mL、100μg /mL、200μg /mL和400μg /mL的系列浓度标准工作溶液。 4 仪器 4.1 气相色谱仪，配氢火焰离子化检测器。 4.2 顶空进样器。 4.3 顶空瓶：20mL。 4.4 分析天平：感量0.0001g。 5 分析步骤 5.1 样品处理 准确称取样品5.0g（精确至1mg），置于顶空瓶中，分别准确加入系列浓度标准工作溶液（3.5）5mL，密封后摇匀，作为加系列标准工作溶液的样品。置于顶空进样器中，待测。 5.2 顶空进样器条件 汽化室温度：70℃；定量管温度：90℃；传输线温度：100℃； 汽液平衡时间：15min。 5.3 色谱参考条件 色谱柱：DB-624石英毛细管柱（30m×0.32mm×1.8μm），或相当者； 柱温程序：初始温度60℃，保持4min，再以40℃/min的速率升温至100℃，保持2min，再以40℃/min的速率升温至200℃，保持2min； 进样口温度：220℃； 检测器温度：230℃； 氮气流速：1.5mL/min； 氢气流量：40mL/min； 空气流量：400mL/min； 尾吹气氮气流量：30mL/min； 进样方式：分流进样，分流比5:1； 进样量：1.0mL。 注：载气、空气、氢气流速随仪器而异，操作者可根据仪器及色谱柱等差异，通过试验选择最佳操作条件，使苯、甲醇与叔丁基羟基苯甲醚中其他组分峰获得完全分离。 5.4 定量测定 用加系列浓度标准工作溶液的样品（5.1）分别进样，以峰面积为纵坐标，标准加入量为横坐标进行线性回归，建立标准曲线，其线性相关系数应0.99。按“6 计算”，计算样品中的苯、甲醇含量。 5.5 平行试验 按以上步骤操作，对同一样品独立进行测定获得的两次独立测试结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。 6结果计算 6.1 确定标准加入单点法中用于计算的标准参考量 选择加标为0 μg/mL的样品作为样品取样量（m），根据样品（m）的峰面积（Ai），选择加入目标物标准品后目标物的峰面积（As）与2 Ai相当的加标样品（mi）作为计算用标准（ms），应用标准加入单点法对样品进行计算。 6.2 计算公式 式中：（目标物）—— 样品中目标物的含量，%； ms —— 加入目标物标准品的量，μg； Ai —— 样品中目标物的峰面积； As —— 加入目标物标准品后样品中目标物的峰面积； m —— 样品取样量，g； mi —— 加入目标物标准品的样品取样量，g。 7 回收率多家实验室验证，方法回收率在之间，8 色谱图 图1 苯与甲醇的气相色谱图 甲醇（2.984min） 苯（6.730） 为加强化妆品的监督管理，国家食品药品监督管理局于2010年月委托工作，开展工作，现就起草工作有关情况说明如下： 起草的必要性 图3. 方法一合成BHA路线图 由上述合成工艺可知，甲醇、苯等有机溶剂是合成BHA常见的残留溶剂。 （二）化妆品中残留溶剂控制的必要性 在药品行业，人用药品注册技术要求国际协调会( ICH