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种公猪精液品质鉴定及稀释保存摘要：公猪的精液品质决定母猪的生产性能和产仔数量与质量，因此，经过稀释后的精液要进行品质鉴定，否则不能进行人工授精。本文简要介绍了种公猪精液品质鉴定的几项主要指标以及操作方式进行检测，另外还就在操作过程中需要注意的具体事项进行简要的说明。 关键词：精液品质；检测；注意事项 中图分类号：S828.3 文献标识码：A 文章编号：1674-0432（2012）-05-0166-1 采集种公猪的精液后，应在最短的时间内进行稀释和保存，而在稀释前应鉴别精液品质的优劣,以此作为新鲜精液稀释和保存的依据,同时也能确定种公猪的配种负担能力。为保证精液不受不良物理、化学、生物因素的影响。对所采精液应规范合理地处理和保存。种公猪精液的品质鉴定检测的主要目的就是快速准确地确定其精液活率,保证输入的精液质量和数量,减少空怀。因为检测种公猪的精液品质是必不可少的。本文就保证种公猪精液品质的几项主要指标及利用何种方式检测做了简要的阐述。 1 种公猪精液品质鉴定方法 1.1 外观评定 种公猪的精液外观评定主要是观察精液的颜色，气味。精液颜色正常要求呈乳白色，无异物，如果精液出现黄脓状，或夹杂杂物，血液，毛发等均为不合格精液，不能作为输精用。猪精的正常气味是略带腥味，如果发现有异味则判定精液不合格。如果发现精液内含血液，臭味，则认为种公猪可能发生生殖器疾病，要及时淘汰。颜色，气味均符合要求的可进行下一步检测。 1.2 精子活力检测 精子的活力是指原精液在37℃条件下呈直线运动的精子占全部精子总数的百分率。首先将显微镜载玻片放在已经升温至37℃左右的载物台上，将精液用移液器滴适量在载玻片上，盖上盖玻片，以无气泡，不能移动为好，分别以显微镜10×10和10×16视野进行观测。精子活动分直线前进、旋转和原地摆动3种，以直线前进的活力最强。肉眼观测一般是按0.1—1.0的十级评分法进行，精液一般可以保存3-4天，要求当天精液活率不低于0.7级，3-4天要求不低于0.6级，活力低于0.5级者，不宜使用。在实际操作过程中还可采用更高端的显微影像工作站去检测精子活力及畸形率，其优势在于此分析系统会自动对精子进行染色，录像，根据精子活动轨迹分析出精子活率。需要注意的是，不同供精单位送的精液稀释方式不同，不同的稀释液或稀释倍数对精子的活率产生不同的影响，使精液活率之间的判定出现差异，因此测精液活力最好采用原精液。 1.3 精子密度检测 根据《种猪常温精液国家标准》，最常用的方法是采用血球计数板。根据对于压线的精子采用的方法是计左不计右，计上不计下的原则计算计数板中五个方格内每格中所分布的精子数目，然后根据计算公式计算出精液中精子的数目。目前更为方便的是采用分光光度计，将配好的空白比色杯作为对照，另一只比色杯滴入适量原精，放入分光光度计，就可以很快测出精子密度及总精子数。正常精液精子密度≥1亿/ml，平均2.5亿，从镜检看精子密度高的精液往往呈云雾状。 1.4 精子畸形检查 正常精子有分为头部和尾部，形状像小蝌蚪，畸形精子有好几种。例如：头部畸形（胖头或者形状畸形等），尾部畸形（双尾、弯尾、卷尾等），顶体缺陷（分节、不完全等）以及胞浆小滴残留。精子畸形率≤20%，一般采用可用普通显微镜测定，但需用伊红或姬姆萨染色。检查方法是，精液涂片、染色后，在400—600倍显微镜下观察，计算畸形精子占所有精子总数的百分率，有条件的可以利用显微影像工作站或者相差显微镜检测和分析出来。 2 精液的稀释与保存 经过品质检查合格的精液应立即进行稀释，稀释时应将精液与稀释液放在同一个30℃的水浴锅中片刻等温后，将稀释液缓慢倒入精液中，并轻轻摇动。一般可根据需要和计算（估算）的稀释倍数和精液量加入适量的稀释液。最少稀释倍数为1:3，最大稀释倍数不超过1:9。精液的保存是为了延长精子的存活时间，扩大精液的使用范围，同时也便于长途运输。可以选择不同的保存温度对精液进行保存，如15℃—25℃的常温保存、0℃—5℃的低温保存、-79℃—196℃的冷冻保存。无论哪种方式，目的都是抑制精子代谢活动，降低能量消耗，延长精子存活时间而不丧失受精能力。种猪的精液一般采用液态保存的方法，虽然保存时间较短，但需要设备简单，操作方便，只需保存在冰箱内即可。 3 注意事项 3.1 精液保存和检测时的温度要求 精液在采集完成后保存及运输过程中，要求保存温度必须在19℃，否则会影响精子活率。精液检测必须要求36℃-38℃的操纵环境，因此有条件的可以制备恒温载物台等，如不具备恒温设备，应该加快操作速度，防止精子活率受温度影响而影响检测结果。 3.2 保证操作环境及仪器设施的整洁 保证全程操作是在干净无尘的室内操作。操作过程中为避免