泥鳅红细胞遗传损伤的显微观察 microscopic-observation of the cytogenetic damage of the erythrocytes of misgurnus anguillicadatus.pdfVIP

第25卷第3期 电 子 显微 学报 V01—25．No．3 2006年6月 ofChineseElectron 2006—6 Journal MicroscopySociety 文章编号：1000一6281(2006)03—0261．04 泥鳅红细胞遗传损伤的显微观察 吴若菁，巫紫君，柯桂芳，庄 捷，陈奋飞 (福建师范大学生物工程学院，福建福州350007) 摘要：通过改进泥鳅红细胞的染色制片技术，清晰地观察到泥鳅红细胞正常的细胞分裂和异常的细胞，分裂，以 及外来诱变物导致泥鳅红细胞遗传损伤而产生的各种核畸变和微核现象，实验结果表明不均等的核缢缩是泥鳅红 细胞的微核来源之一。 关键词：泥鳅；红细胞；显微观察 文献标识码：A 中图分类号：Q952．4；Q959．9；Q336 迅速均匀涂开。涂片晾干后甲醇固定15min，用4种 泥鳅(施昭nm“so粥“删cod以Ms)是一种分布极为 广泛、取材方便、不受季节限制、易养殖及生活力强 不同方法处理：①以Giemsa染液染色15min，再用清 的水生生物。其血红细胞具核，在外来诱变剂的作 水(或磷酸缓冲液)冲洗，晾干。②以改良石炭酸品 用下会出现微核和各种核畸变现象。因此，近年来 红染色液染色10min，清水(或磷酸缓冲液)冲洗，晾 研究者们将泥鳅作为指示生物，用来监测水体的污 染，取得了较理想的效果¨“o。但由于泥鳅红细胞 液)冲洗，晾干。④先用wright染液染色1一nin，用磷 的核较小，如果显微制片染色技术不合适，则会严重 影响统计结果的精确度。为此，本文对泥鳅红细胞 清水(或磷酸缓冲液)冲洗，晾干。 的显微制片染色技术进行改进，并在此基础上观察 1．2．3显微观察 外来诱变物对泥鳅红细胞的遗传损伤状况的影响和 泥鳅染色后的涂片，在0LYMPus显微镜下40 探讨微核来源，为利用水生生物的细胞遗传损伤来 ×观察，并用数码相机拍摄。微核评定标准：微核存 监测水体污染提供理论和技术依据。 在于胞质中，为主核的1／10～1／30，圆形或椭圆形， 颜色与主核一致或略深略浅于主核。 1材料与方法 2结果与讨论 1．1 材料 2．1 不同染色方法的比较 泥鳅(蚴殛umwo门gMizzic8如觚)购自福州市程埔 头市场。挑选健康活泼和体表无损的，体长12cm± 实验结果表明：泥鳅在外来诱变因子的作用下， 2cm，体重129±29的泥鳅作为实验鱼。 红细胞会产生遗传损伤，出现单微核、多微核和各种 1．2 方法 核变异现象。但由于泥鳅的细胞核较小，如果细胞 1．2．1泥鳅的诱变处理 核染色浅，微核不清晰或者细胞轮廓不清晰，在统计 以曝气后的自来水饲养泥鳅作为对照组，用污 分析中易造成较大的误差。因此，一张好的显微观 染的河水和国产分析纯的NaHsO。，Hgcl：作为诱变察片瘟具备细胞分散好、不重叠、细胞轮廓清晰、细 剂，用曝气后的自来水配置成不同浓度进行处理，每 胞核染色深及微核清晰可见的标准。本实验采用不 个处理都用统一规格的水桶装5L溶液，而后投放泥 同染色方法处理的结果见表1。从表中可以看出： 鳅。 第1、3种方法微核不清晰，第2种方法细胞轮廓不 1．2．2泥鳅的涂片与染色