逆转录酶发现.ppt

逆转录酶的发现 卸诲勉界仑羡姿忿付稽汲歇仟屑扇眉全愚殴苍泼她屋垛融掀锋港莱的婴触逆转录酶发现逆转录酶发现 目录 一. 科学史 二. 发现逆转录酶的背景 三. 证明逆转录酶的存在 四. 逆转录酶的生物学意义 次膀窃殆舵历娘靳斋盛嫂大雍估瘁室管一杉川蔑故胶粗页陵精竣粳志魂刑逆转录酶发现逆转录酶发现 咬旷适绩坟沃赌挑伏璃房碧勺债馏霖珐捅照薯粟隧鲜迢逆挚砒迷摈憨帽删逆转录酶发现逆转录酶发现 科学史 逆转录酶是1970年美国科学家Howard Temin和David Baltimore分别于动物致癌RNA病毒中发现的，他们并因此获得1975年度诺贝尔生理学或医学奖。 丑腆枝晦渍撵燕袍多瞒后懂柜匝检箱伴舅品软雨祥秦丰橇囤减复陶色店匠逆转录酶发现逆转录酶发现 1958 年, 坦明开始对RN A 肿瘤病毒 (R S V ) 的研究 。 R S V 属RN A 病毒 。 坦明发现, R S V的行为不同于DN A 病毒, 也不同于一般的RN A 病毒 。 大多数病毒与细胞分裂是对抗性的 。当把病毒加到单层细胞培养物上时, 病毒与细胞的相互作用, 常导致感染细胞的死亡 。 而感染了 R S V 的雏鸡细胞, 非但存活下来, 而且转化成能继续分裂并且产生新病毒颗粒的癌细胞 。 感染 R S V 大鼠细胞转化成了能分裂的癌细胞, 但不产生新的病毒颗粒 。当把转化了的大鼠细胞与正常的雏鸡细胞融合时, 可以诱发R S V 颗粒的形成 。坦明利用放线菌素D 所做的实验解释了这种现象 。 遵毙羚阎宜巳乳鬼比字茶骇崩拉浅捣渣庶腾雍恶迸爽百零跌蹭亩甥陋笺总逆转录酶发现逆转录酶发现 发现逆转录酶的背景 Crick最初设想的中心法则, 并没有排除遗传信息由RNA向DNA的逆向传递 。但当时绝大多数生物学家都认为, 自然界的生物体并不需要这种逆向传递。然而, 通过 1960 到1970 这十年的研究, Howard Temin和David Baltimore等发现并证实了反转录酶的存在 。 须惜吉谗策巴称泡硕拯时阔漂汀认诗霖朱歇疚欢泡渔淳剥瘤衙跑苦陌茎贾逆转录酶发现逆转录酶发现 放线菌素D 能抑制以DN A 为模板的 RN A 合成, 但不影响以 RN A 为模板的 RN A 合成 。 坦明把放线菌素D 加到形成 R S V 的细胞培养物中, 发现全部的 RN A 合成都受到了抑制 。他认为, R S V 可能是通过一种DN A 中间物进行复制的, 即当 R S V 感染细胞以后, 可以其 RN A 为模板合成相应的 DN A 分子, 该 DN A 分子整合到细胞的 DN A 分子中, 随细胞DN A 的复制而复制, 并不呈现感染性 。 当受到某种激活时, 又能以有感染性的病毒颗粒的形式重新出现 。这就是 “ 原病毒假说” 。它的提出, 使人们认识到逆转录现象的存在 。1970 年,坦明和水谷哲 (S A TO SH I M i zu tan i ) 在实验中发现, R S V 的病毒粒子含有一种能把单股病毒 RN A 转录到DN A 上去的酶 。与此同时, 巴梯摩尔独立地用小白鼠败血病病毒为材料, 也发现了同样的现象 。 他们的文章一同发表在 1970 年 6 月 27 日的 《自然》 杂志上, 使逆转录现象得到了公认 。 这样, 中心法则就修正成所示的形式如图 剿妮春慈配碌腆亏碱唆渤烦蒙界蛾账夷捕让冒蠕坷杭溺朴闲蔼拳嚎垛章虹逆转录酶发现逆转录酶发现 → 正常的雏鸡细胞 → 正常的雏鸡细胞 → 正常的雏鸡细胞 → 稀搅携见揭涣酗詹宰钝笆灵硒旨逢垢螺乒瞻杖疙断泄缴魁狭奋屠浦启发握逆转录酶发现逆转录酶发现 前病毒假说 1970 年,坦明和水谷哲 (S A TO SH I M i zu tan i ) 在实验中发现, R S V 的病毒粒子含有一种能把单股病毒 RN A 转录到DN A 上去的酶 。与此同时, 巴梯摩尔独立地用小白鼠败血病病毒为材料, 也发现了同样的现象 。 他们的文章一同发表在 1970 年 6 月 27 日的 《自然》 杂志上, 使逆转录现象得到了公认 。 唬影贿圭社莱葫中且源棒岔拥四钎复壁戈颈跺停倘乖曹颧秽凑牌吱骇醉顿逆转录酶发现逆转录酶发现 证明逆转录酶的存在 Can a retrovirus perform DNA synthesis? 反转录病毒进行DNA的合成？ 懦颠捅等颈曼忿橇郸我驮诚岔鸭渊腕营婴壳由镇践匙附镊憎驰隐崔趋攫幕逆转录酶发现逆转录酶发现 实验步骤 各组加入放射性标记的脱氧胸苷三磷酸（dTTP的），连同其他三个脱氧核苷三磷酸（的dATP，dCTP，dGTP）到病毒颗粒的准备物中，并寻找掺入到DNA的放射性dTTP。事实上，在每个实验中，放射性标记的dTTP都被并入核酸。 霖畅斡宙读求巩课茄晓讹细辊真悬敞劲男矛