透明质酸对扩张包膜影响临床的研究.pdfVIP

中文摘要 透明质酸对扩张包膜影响的临床研究 摘 要 目的：本课题旨在探讨透明质酸对扩张包膜的厚度、胶 原纤维含量、毛细血管数量、成肌纤维细胞数量及其微细结 构等的作用，阐明在扩张器植入术后包膜形成过程中，透明 质酸对成纤维细胞向成肌纤维细胞的转化以及胶原纤维的 合成与分泌所产生的影响，揭示透明质酸干预扩张包膜形成 的作用机理，为临床提供一种能有效防止因扩张包膜挛缩而 导致扩张后皮瓣利用率降低的新方法，进一步提高皮肤扩张 术的疗效。 方法： 1临床资料 行皮肤软组织扩张术治疗的患者共28例，男16例，女12 2 例，年龄l8．32岁，平均22岁。其中扩张器埋植于头部1 例，面颈部8例，躯干部8例。 2分组 本实验采用自体对照，在患者病变周围，于皮下浅筋膜 深层剥离足够大的腔隙，两侧各埋植相同容量皮肤软组织扩 张器一枚，将其中一侧设为实验组，另一侧设为对照组。 3植入扩张器及注水扩张 实验组在腔隙剥离完成后，以双极电凝彻底止血，观察 无活动性出血后，将1％医用透明质酸钠凝胶3ml均匀涂布 于剥离腔隙的周壁，然后植入皮肤软组织扩张器一枚；对照 中文摘要 组腔隙剥离完成后，直接常规植入同等容量皮肤软组织扩张 器一枚，不涂布透明质酸。待术后第5天开始注水扩张，采 用常规扩张方法，视情况3．4天注水扩张一次，每次注水量 以皮瓣指压反应4．5秒为限；保持同一患者的实验组与对照 组每次注水量相同。注水达所需容量后(一般为额定容量的 150％一200％)停止注水。开始静止扩张，静止扩张期一般 为6周。 4取材 二期手术时，在两组扩张皮瓣对称部位剥取扩张包膜， 平铺于无菌纱布上，剪取部分组织块．200C冰箱保存，待行 羟脯氨酸测定；将剩余部分四角缝合固定后浸入4％多聚甲 醛固定，待行石蜡包埋常规HE染色、Masson染色及免疫组 化CD34染色与a．SMA染色。另外分别在两组相同部位包膜 以4％戊二醛固定24h后送透射电镜检查。 5观测指标 (1)扩张包膜厚度：光镜下观察常规HE染色切片实验 组和对照组组织学变化，并应用显微标尺测量标本厚度；(2) 胶原纤维分布及形态：对比Masson染色切片实验组与对照 组胶原纤维的分布及形态，比较两组绿染的面积及其疏密粗 细；(3)免疫组织化学检测及半定量图像分析：CD34及 0【．SMA染色切片中，半定量图像分析实验组和对照组扩张包 量实验组和对照组包膜中羟脯氨酸含量(HPr)；(5)透射电 镜下观察实验组和对照组标本中成肌纤维细胞内的细胞器 和微丝的变化，以对比两组中成肌纤维细胞的微观差异。 中文摘要 6统计学处理 应用SPASS11．5统计学处理软件，对实验结果进行统计 学处理。 结果： 1 HE染色及扩张包膜厚度测定 光镜下可见实验组与对照组中均有大量的成纤维细胞 (在该片中成纤维细胞与成肌纤维细胞区分不明显)，并有 少量新生薄壁毛细血管散在于视野中；实验组中幼稚期的成 纤维细胞数目明显比对照组多；而对照组中成熟期的成纤维 细胞即纤维细胞数目较多，且对照组较实验组有更多更粗大 的红染胶原纤维排列。 应用显微标尺测量HE染色切片中扩张包膜的厚度。实 838．57+55．499m，两组比较有统计学差异(PO．05)。 2Masson染色及胶原纤维的分布及形态 光镜下观察Masson染色切片，实验组：绿染的胶原纤 维纤细，排列稀疏，其间可见较多红染的纤维素，成纤维细 胞核呈细梭形，灰黑色，里层可见一层内皮细胞样内衬，偶 见红染的红细胞；对照组：绿染的胶原纤维粗大，排列规则， 红染的纤维素较少，成纤维细胞呈长梭形，散在分布。 3鉴定毛细血管的CD34的表达 光镜下CD34染色切片中可见毛细血管内皮细胞被标记 成黄褐色，散在于视野中。实验组与对照组CD34的表达强 度均为阳性表达，图像分析结果显示实验组较对照组稍有降 低，但并无统计学差异(P0．05)。 4鉴定成肌纤维细胞的0t．SMA的表达