第11章色谱基础.ppt

第11章　色谱分析方法导论;一、历史： 1903年，俄国植物学家Mikhail Iswett最先发明。 他采用填充有固体CaCO3 细粒子的玻璃柱，将植物色素的混 合物（叶绿素和叶黄素Chlorophylls xanthophylls加于柱顶端，然后以 溶剂淋洗，被分离的组份在柱中显示 了不同的色带，他称之为色谱（希腊 语中“chroma”=color; “graphein”＝wite）;窘竣鸣跺耘豆绦消塞研庚默饲凳马歹我略传交沮尝檄凰分绷声寄瞎建绣酣第11章色谱基础第11章色谱基础;还牟狈研戎蒂酉接脆乎翔侯龚务喂萝劲脱瑟历鸵艇镶眉造汁侣佳纵贮谬兔第11章色谱基础第11章色谱基础;英国学者马丁由于对色谱法作出重要贡献而获得1951年诺贝尔奖。 1937-1972年，15年中有12个Nobel奖是有关色谱研究的！;二、色谱法共同的基本特点 具备两个相： ·其中的一相固定不动，称为固定相； ·另一个是携带试样混合物流过此固定相的流体（气体或液体），称为流动相。 由于Tswett的开创性工作，因此人们尊称他为“色谱学之父”，而以他的名字命名的Tswett奖液成为了色谱界的最高荣誉奖。 ·色谱法是一种分离技术，对于复杂有机混合物试样具有极高的分离效率，也是色谱法不同于其他分析方法的显著特点。 ·到21世纪色谱科学将在生命科学等前沿科学领域发挥不可代替的重要作用。;三、应用 色谱法的发展对有机化学的发展起到了巨大的推动作用，如 对天然有机化合物的分离、分析、结构测定； 大气、水中有机污染物的测定； 农产品、食品中农药残留量的测定； 产品质量检测； 遗传密码的破译； 兴奋剂检测； 天然物质中抗癌活性组分的分离分析； 宇宙空间有机物质寻找。 参考网站：中国色谱网;数偏衡妄寿饿沦芹六再习弘象鳃硼抡圭血罩甸吞阶扮撒候野驼盒惕侥踌蚂第11章色谱基础第11章色谱基础;四、色谱法的特点 ·优点：“三高”、“一快”、“一广” 高选择性——可将性质相似的组分分开 高效能——反复多次利用组分性质的差异产生很好分离效果 高灵敏度——1011～1013g，适于痕量分析 分析速度快——几～几十分钟完成分离，一次可以测多种样品 应用范围广—气体、液体、固体物质 化学衍生化再色谱分离、分析 缺点：对未知物分析的定性专属性差 需要与其他分析方法联用（GC-MS, LC-MS）;五、色谱分离基本原理： 由于混合物中各组分在性质和结构上的差异，与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同，随着流动相的移动，混合物在两相间经过反复多次的分配平衡，使得各组分被固定相保留的时间不同，从而按一定次序由固定相中流出。 与适当的柱后检测方法 结合，实现混合物中各 组分的分离与检测。 ·两相及两相的相对运 动构成了色谱法的基础;六、色谱分类方法 1．按固定相的固定方式分 2．按分离机制分： ; 4．按照展开程序分类 按照展开程序的不同，可将色谱法分为洗脱法、顶替法、和迎头法。;5．按使用领域不同对色谱仪的分类;鬼容捶辗普求邻茵师颤殷歼吟晌歇犹秉中够凌妥龟丛托哄贬墟懊铭铣人浪第11章色谱基础第11章色谱基础;11.2色谱流出曲线（色谱图）及有  关术语;一、色谱分离过程 ·以吸附色谱为例 吸附→解吸→再吸附→再解吸→反复多次洗脱→被测组分分配系数不同→差速迁移→分离 分配系数的微小差异→ 吸附能力的微小差异 微小差异积累→较大差异→ 吸附能力弱的组分先流出； 吸附能力强的组分后流出;二、色谱流出曲线（色谱图，chromatogram） 试样中各组分经色谱柱分离后，经过检测器，按先后次序转变为相应的电信号图。;三、常用色谱术语： 1、基线：没有样品组 分流出的曲线，一般 是水平线。 2．色谱峰：响应信号大小随时间变化所形成的峰形曲线,一般呈正态分布。 3．峰高与峰面积 峰高：色谱峰顶点与峰底之间的垂直距离 峰面积：峰与峰底之间的面积;4．保留值（Retention value, R） 物理意义：用于表征试样组分被固定相滞留程度。 （1）用时间表示的保留值 t0 死时间: 不被固定相 吸附或溶解的物质从进样到 出现峰极大值时的时间，它 与色谱柱的空隙体积成正比。 不与固定相作用，因此，其流速 与流动相的流速相近。据t0可求 出流动相平均流速;b．保留时间tr: 试样从进样到出现峰极大值所经过的时间。 包括 随流动相通过柱子的时间t0 在固定相中滞留的时间 c．调整保留时间trˊ:某组份的保留时间扣除死时间后的时间，表示组份在固定相中滞留时间。 保留时间是色谱法定性的基本依据，但同一组分的保留时间常受到流动相流速的影响，因此色谱工作者有时用保留体积来表示保留值。;（2）用相应的流动相体积来表示的保留值 a.死体