第11章色谱.ppt

色谱分析法;一.色谱法的发现 ;色谱分析——基于物质的物理性质进行分离和分析的方法。;样品混合物中各组分性质和结构的差异，与固定相发生作用的大小也有差异;三. 色谱法的分类 ;;2. 液相色谱法;四. 色谱分析仪器基本流程;液相色谱仪;流动相携带混合试样由进样装置进入色谱柱 混合试样在色谱柱中进行分离 各组分依次进入检测器 检测响应信号导入计算机 得到色谱图 根据色谱图参数进行定性定量分析;五. 色谱法的特点 :; 关于色谱峰 关于保留值 关于峰宽度 关于色谱曲线的意义;1. 关于色谱峰的术语;(1) 色谱流出曲线 ;; （2）用体积表示的保留值;（3）相对保留值 r21---选择性因子?;3. 关于色谱峰区域宽度的术语; 4. 色谱曲线的意义 色谱峰数=样品中单组分的最少个数； 色谱保留值——定性依据； 色谱峰高或面积——定量依据； 色谱保留值或区域宽度——色谱柱分离效能评价指标； 色谱峰间距——固定相或流动相选择是否合适的依据。;;分离度R;理论上证明: 对于峰形对称的色谱峰; 要改善物质对的分离（提高R），即提高两相邻物质的分离度，增大r21 是最有效的手段。 ;三、色谱定性定量方法;糕姥崩和幢考钥贤眺缺对廖膨爪攀薛异彩脸朴远卤灶底蹦昏蛤沁滚庄境蔗第11章色谱第11章色谱;应用范围：适用于简单混合物，对该样品已有了解并具有纯物质的情况。 优点：应用简便，不需要其他仪器。 缺点：定性结果的可信度不高。 提高可信度的方法：双柱、双体系定性;(2) 与其他方法结合定性;2. 定量分析的方法 ;A）各种峰面积的测量方法;B）定量校正因子的测量与计算;C）计算组分含量的几种方法;适用条件：;Ai/As;适用条件 ：;一、气相色谱仪的流程;1.载气系统 : ;二. 分离原理;;2. 分配系数 K ：;总结 :;三. 气相色谱固定相及其选择;2. 气-液色谱——担体+固定液;固定液：;固定液类型;以非极性角鲨烷的P=0 强极性??ˋ一氧二丙腈P=100;(4) 固定液的选择;;热丝;;(3) 检测原理 基于不同的物质具有不同的热导系数 (4) 操作条件的选择 ;;;(3) 原理 蒸气分子受激发后被离子化，在电场作用下定向运动形成离子流，然后进行放大和记录。 (4) 操作条件的选择 气体流量 载气:氢气:空气=1:1:10 气体纯度：要求高 使用温度：大于80℃;1. 载气的选择;2. 柱温的选择;tc=45℃;一般比柱温高30~70℃;§3、气相色谱法;2. 与填充柱气相色谱系统的区别;一、概述;2. 高效液相色谱法的特点;二. 高效液相色谱仪;1. 高压输液系统;2．进样系统 ;3. 分离系统——色谱柱 ;4．检测系统 ; 表. 液相色谱常用检测器的一般性质 ;1. 紫外检测器;固定波长的紫外检测器 可变波长的紫外检测器 二极管阵列检测器;(A) 固定波长的紫外检测器; (B) 可变波长的紫外检测器;(C) 光电二极管阵列检测器;2. 差示折光检测器;§4、高效液相色谱法;示差折光检测器;§4、高效液相色谱法;§4、高效液相色谱法;三. HPLC主要分离类型及其原理 ;;§4、高效液相色谱法;(2) 反相键合相色谱法： 固定相：非极性键合相，如C8柱，C18柱流动相：极性溶剂，甲醇-水、乙腈-水等 适用范围：分离非极性、极性和离子性化合物 分离选择性：极性强的组分先洗脱出柱。;(3) 固定相 ;§4、高效液相色谱法;(4) 流动相;流动相的强度和选择性 溶剂的极性（强度） 正相色谱：溶剂极性越强，洗脱能力越强 反相色谱：极性弱的溶剂洗脱能力强 溶剂的选择性 不同种类的溶剂，分子间的作用力不同，故选择性不同 混合溶剂（二元或多元流动相）;溶剂的种类 正相：正己烷、正庚烷、乙醚、二氯甲烷、氯仿等，己烷为主体，加入质子接受体乙醚或甲基叔丁基醚，质子给予体氯仿，偶极溶剂二氯甲烷 反相：水、甲醇、乙腈、四氢呋喃、乙醇及其混合物等，以水为主体，加入质子接受体甲醇，质子给予体乙腈，偶剂溶剂四氢呋喃。;;2. 液固色谱法; ; 硅胶为固定相时：以弱极性的正构烷烃为主体，加入二氯甲烷等中等极性溶剂调节合适的洗脱强度。 可用水对硅胶进行减活处理，或加入四氢呋喃、乙腈、甲醇、异丙醇等改性剂;(4) 应用;3. 离子交换色谱法和离子色谱法 ;（2）固定相 离子交换树脂，根据功能基分为 强酸型（磺酸基团） 强碱型（季铵基） 弱酸型（羧酸） 弱碱型（伯、仲、叔胺）;（3）流动相 双柱抑制型：分离阳离子，一般采用无机酸如HCl，HNO3等；分离阴离子，一般采用NaOH、NaHCO3/NaCO3。 单柱非抑