PUMA在肝外胆管细胞癌中的表达.doc

PUMA在肝外胆管细胞癌中的表达及临床意义 李海林1，戴海平2，刘秋梅3 作者单位：157000黑龙江牡丹江 牡丹江医学院红旗医院1.普外科；2.病理科；3.消化科【摘要】目的 探讨PUMA蛋白在胆管细胞癌中的表达与胆管癌的临床病理关系，探讨其表达与肿瘤发生发展的关系。方法 应用免疫组化法检测60例肝外胆管细胞组织与正常胆管细胞组织中PUMA的表达情况。结果 胆管细胞癌组织PUMA的表达率为38.3%，低于癌旁组织中（48.3%）和正常胆管组织（63.3%）。其表达与肿瘤大小、分化程度及淋巴转移情况有关，与病人年龄、性别及肿瘤部位无关。结论 PUMA的表达缺失与肝外胆管癌的发生发展有着密切的关系。 【关键词】PUNA；肝外胆管癌 【中图分类号】R 735.8 【文献标识码】A Expression and Clinical Significance of PUMA in extrahepatic cholangiocarcinoma LiHailin1 ,DaHaiping2, LiuQiumei3 Department of general surgery，the Affiliated Hongqi Hospital of Mudanjiang Medical University，Mudanjiang 157000，China 【Abstracts】 Objective To investigate theexpression of PUMA in cholangiocarcinoma and their clinicalopathological correlations.Methods Detect 60cases of extrahepatic cholangiocarcinoma and normal bile duct tissue by application of immunohistochemmistry.Results The positive expression rate of Cholangiocarcinoma tissue (38.3%)was lower than the adjacent tissue (48.3%) and normal bile duct tissues (63.3%).The expression of PUMA has relationship with size of the tumors and degree of differentiation and Lymphatic metastasis.Conclusion The absent expression of PUMA is closely correlated with The occurrence and development of extrahepatic cholangiocarcinoma 【Key words】 PUMA；extrahepatic cholangiocarcinoma 胆管癌是一种恶性程度高的恶性肿瘤，近十年来胆管癌的发病率逐年升高，其发病率不低于胆囊癌及胰腺癌[1]其发病率随年龄的增长而增长，肿瘤体积小，难以早期诊断及治疗，进展较快，恶性程度高。其病因至今不明，虽然胆管癌的发病机制不明，但肿瘤细胞凋亡障碍及与细胞增生之间的失衡是导致其发生、发展的重要原因之一。PUMA是近来发现的一种具有强大的促凋亡作用的基因。研究发现，许多恶性肿瘤都存在PUMA表达缺失[2]，目前国内关于胆管癌PUMA表达相关性的研究较少，因此，本研究采用免疫组化方法研究胆管癌组织中PUMA的表达，并分析其与胆管癌生物学行为的相关性，探讨其在胆管癌发生发展中起到可能的作用机制。 1材料和方法 1.1 标本来源及一般资料 收集牡丹江医学院红旗医院2006年至2012年行胆管癌切除手术的肿瘤标本蜡块。男34例，女26例。高分化25例，中分化12例，低分化23例。根据UICC的TNM分期，Ⅰ期7例，Ⅱ期20例，Ⅲ期30例Ⅳ期3例。癌旁组织取自距肿瘤较近的胆总管切缘阴性标本。正常胆管组织取自残留正常胆管切端。所有标本均经10%中性甲醛固定，石蜡包埋，4um连续切片。 1.2 免疫组织化学染色 兔抗人PUMA多克隆抗体为美国Santa Cruz公司产品。二抗EnVision染色试剂盒购自于瑞士DaKo公司。 1.3 试验方法 采用EnVision二步法简要步骤：石蜡切片、脱蜡、水化。微波修复抗原（详见说明书），每张切片加1滴3%H2O2,室温下孵育20分钟，阻断内源性过氧化物酶，PBS冲洗3次，3分钟/次。去除PBS液，滴加非免疫动物的血清，室