产肠毒素性大肠杆菌致病特性及益生菌的筛选疾病控制研究-yzxzcom.DOCVIP

 产肠毒素性大肠杆菌致病特性及益生菌的筛选、疾病控制研究( 朱红梅1 周涵韬1 刘波2 （1.厦门大学生命科学学院；2.福建省农业科学院） 1 前言 1.1 肠毒性大肠杆菌的研究概况 产肠毒素性大肠杆菌（Enterotoxigenic Escherichia coli，ETEC）是一类引起人和幼畜（初生仔猪、犊牛、羔羊及断奶仔猪）腹泻的重要病原菌，初生幼畜被ETEC感染后，常因剧烈水样腹泻和迅速脱水而死亡，发病率和死亡率均很高，这是目前养殖业研究热点之一（周凯等，2003）。据估计，国内约有35%的仔猪腹泻是由ETEC引起的（杨正时，1987），美国等国家新生仔猪腹泻中，由ETEC引起的占45%以上（余志东，1992），给养殖业带来严重的经济损失。下面就ETEC病原学、致病机理、临床症状、治疗及防制等研究进展作一概述。 1.1.1 ETEC病原学特性 ETEC属于肠杆菌科（Enterobacteriaceae）埃希氏菌属（Escherichia）成员，为革兰氏阴性的直杆菌。大小月0.5～0.8×1.0～3.0(m，无芽孢，大多数菌株有动力。有普通菌毛与性菌毛，有些菌株有多糖类荚膜。ETEC最佳生长温度为37℃，最佳pH值为7.2～7.4。在普通琼脂上生长良好，可形成圆形、边缘整齐、稍隆起、光滑、半透明的灰白色菌落。在鉴别性或选择性培养基上形成有颜色、直径2～3mm的光滑型菌落。生化反应：能分解多种糖(醇、苷)类，使其产酸或产气；吲哚试验和M.R.试验均为阳性；V. P.试验和柠檬酸盐利用试验均为阴性。易产生耐药性。胆盐、煌绿等对大肠杆菌有抑制作用。对磺胺类、链霉素、氯霉素等敏感，但易耐药。迄今，已确定的ETEC O抗原有173种，K抗原有80种，H抗原有56种（陆承平，2001）。O抗原在菌体胞壁中，属多糖、磷脂与蛋白质的复合物，即菌体内毒素，耐热（120℃，2h），是大肠杆菌血清分群的基础，在鉴定和流行病学调查中十分有用，国内ETEC O抗原具有多样性和地域性，但同时存在着优势血清型，主要有O8、O9、O20、O45、O60、O101、O138、O139、O147、O149等。K抗原系表面多糖或蛋白质抗原，存在于荚膜、被膜或菌毛中，与细菌毒力有关。根据耐热性等不同，K抗原分为L、A、B三类。H抗原为不耐热的鞭毛蛋白质，具有良好的抗原性。 1.1.2 ETEC的毒力因子及致病机理 ETEC的毒力因子包括粘附素（adhesin）、肠毒素（enterotoxin，Ent）、水肿病毒素（edema disease principle，EDP）、内毒素（endotoxin）、溶血素（hemolysin）以及新近才发现的Eat A（Patel S K et al，2004），其中粘附素和肠毒素对ETEC是主要的致病因素（Levine. M M.，1987；Osek L et al，1992；袁万哲等，2005）。ETEC粘附素与O抗原群和肠毒素产生的关系见表1.1（房海，1997）。 表11 ETEC粘附素与O抗原群和肠毒素产生的关系 Table 1.1 Relationship of O antigen， enterotoxin and fimbrial of ETEC 粘附素种类 来源 相关的主要O抗原群 肠毒素类型 LT ST LT+ST K88仔猪O8 、O45、O60、O138、O139、 O141、O147、O149、O157 + + +（居多） K99 犊牛、羔羊、仔猪 O8 、O9、O20、O101、O64 - + - 987p 犊牛、羔羊、仔猪 O9、O20、O141 - + - 粘附素 粘附是微生物定殖（colonization）的基础，也是细菌致病感染的先决条件之一。凡具有粘附作用的细菌结构成分，统称为粘附素或定居因子（colonization factor）。通常是细菌表面的一些大分子结构成分，主要是革兰氏阴性菌的菌毛，其次是非菌毛粘附素，如某些外膜蛋白以及革兰氏阳性菌的脂磷壁酸等。ETEC的蛋白性菌毛呈纤维型包在菌体抗原表面，具有保护细菌免受补体的杀灭和巨噬细胞的吞噬的作用(Nagy et al.，1978 )。这种ETEC特有的菌毛与普遍存在于大肠杆菌的I型菌毛不同，对红细胞的凝集反应不被D甘露糖抑制，是一种甘露糖抵抗的血凝反应（房海，1997）。黏附素抗原主要有K88（K88ab， K88ac， K88ad）， K99，987p，F41，F42等几种，其中K88是最常见的（Gaastra W et al，1982），而K88变异体的主要形式是K88ac。 ETEC菌毛与肠粘膜上皮不同的受体结合（Ouwehand et al，1996），定居在肠道上皮细胞上，